论文部分内容阅读
探讨心宁胶囊对大鼠心肌细胞缺氧／再复氧损伤模型的保护作用机制，由此从细胞生物学水平初步阐明心宁胶囊的作用机理。
方法：
1．用差速贴壁法培养纯化SD大鼠心肌细胞，制成浓度为5x 10<5>／ml的细胞悬液，接种于六孔培养板中，用含20％FBS的高糖DMEM培养液培养，以α-actin鉴定心肌细胞，观察细胞生长状况。
2．用原代培养的心肌细胞复制缺氧／再复氧损伤模型，设立空白对照组，缺氧／再复氧组，合贝爽注射液组(600ng／ml)，心宁胶囊小剂量组(1.7g／ml)，心宁胶囊中剂量组(17μg／ml)，心宁胶囊大剂量组(170μg／ml)六个组。分别从形态学、生物化学、细胞生物学等方面研究心宁胶囊对大鼠心肌细胞缺氧／再复氧损伤的保护作用及其机制。
结果：
1．通过差速贴壁法可分离纯化获得细胞，经鉴定为心肌细胞，纯度为90％左右。培养3-5天后即可进行实验。
2．心宁胶囊能明显提高受损心肌细胞的活力，降低乳酸脱氢酶(LDH)活性表达，可显著减少细胞凋亡的发生。
3．心宁胶囊可显著提高超氧化物歧化酶(SOD)活性，减少丙二醛
(DMA)的含量，降低心肌细胞内钙离子浓度，使bc1-2基因的表达增加，抑制bax基因的表达，从而抑制心肌细胞凋亡的发生。实验结果与模型组相比，差异显著；与西药合贝爽组比较无明显差异性。结论：
1．心宁胶囊对心肌细胞缺氧／再复氧损伤具有良好的保护作用，其作用机制可能与抗氧自由基损伤、拮抗钙超载有关。
2．心宁胶囊可显著抑制缺氧／再复氧损伤心肌细胞凋亡的发生，可能与其影响凋亡相关因子Bc1-2、Bax的表达有关。