四个花生优良品种再生体系的构建

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为了建立高效的花生植株再生体系,为遗传转化奠定基础,本试验以广西农业科学院经济作物研究所育成的花生优良品种桂花17、桂花25、桂花26、桂花1026为材料,分别从器官发生途径和体细胞胚发生途径研究了组织培养条件下花生植株再生的各影响因素,主要包括种子预培养天数、外植体来源及切割方式、蔗糖浓度、外源激素种类及浓度、基因型等对花生不定芽及体细胞胚的诱导、分化成苗、生根等不同发育阶段的影响,结果如下:1、不同来源外植体,诱导不定芽和体细胞胚时,效果明显不同,胚小叶较易诱导不定芽和体细胞胚,下胚轴无不定芽和体细胞胚形成。2、诱导不定芽和胚性愈伤组织时取材时间和部位很重要,以种子经过预培养3天的胚小叶近叶柄部1/3处横切的部位诱导率最高;预培养时间过长,叶片分化程度高,木质化程度增加,不定芽和体细胞胚的诱导率明显下降。3、培养基中添加40g/L蔗糖较利于花生的组织培养。4、激素种类及浓度配比对于不定芽和体细胞胚诱导非常关键,诱导不定芽的最佳培养基是:MS+6mg/L6-BA+1mg/LNAA或MS+0.5mg/LTDZ+0.4mg/LNAA,不定芽发生率分别是82.63%和75.56%,但诱导阶段使用TDZ对不定芽点进一步伸长成芽丛有一定的阻碍,成芽率最高只有12.44%。诱导体细胞胚发生的最佳培养基是:MS+10mg/L2,4-D或MS+5mg/L Picloram,添加的外源激素浓度过高,外植体容易产生褐化现象;Picloram诱导的胚性愈伤组织质量很好,但分化成苗能力较差,成苗率只有1.63%~2.59%。5、不定芽点在MS+2mg/L6-BA+0.4mg/L NAA中成芽率较高,体细胞胚在MS+3mg/L6-BA+0.4mg/LNAA中成苗率较高。6-BA浓度过高或过低,均不利于芽点和体细胞胚生长。6、芽生根需要NAA诱导,1/2MS+3mg/LNAA利于芽生根,生根数为3~4条/株。7、花生不同品种在相同培养基中的植株再生能力不同,桂花17不定芽诱导率、成芽率、生根率最高,分别达82.63%、28.68%和77.14%,桂花26次之,桂花1026最少;桂花26体细胞胚发生率、产胚数、成苗率最高,分别达45.83%、4.83个和35.71%,桂花1026次之,桂花25未成苗。不同花生品种和不同激素处理的胚小叶产芽数差异不显著,产芽平均数为4个左右,产胚数则差异显著,平均在2.19-4.83个
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