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背景:青环海蛇是我国传统的中药之一,常用于风湿痹症、四肢麻木、关节疼痛、疥癣恶疮、中风等症状。但是它的活性成分和作用机制在很大程度上是未知的。本课题组前期采用T7噬菌体展示技术以人重组肿瘤坏死因子Ⅰ型受体（hrTNFR1）为底物淘选青环海蛇蛇毒毒腺T7噬菌体展示文库,通过T7噬菌体展示技术筛选得到了一条22个氨基酸的短肽（Hydrostatin-SN1）,前期利用SPR分析结果显示此短肽能够与TNF-α的两种受体TNFR1、TNFR2结合,与TNFR1、TNFR2的结合解离常数分别为32μM和220μM。细胞实验和动物模型实验结果表明Hydrostatin-SN1具有一定的抗炎活性。炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease,IBD）是一种牵累回肠、直肠、结肠的特发性肠道的慢性炎症疾病,分为溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis,UC）和克罗恩病（Crohn’s Disease,CD）。主要的临床症状为反复的腹痛、腹泻、腹部包块、黏液血便、肠梗阻、肠穿孔、体重减轻等,此外还可呈现出各种不同程度的全身病症。近几年来包含中国在内的亚洲地区的发病率呈直线上升趋势,严重影响了患者的生活质量和生活水平。IBD已经成为了消化系统疾病的研究热点之一,但目前临床上尚未有针对IBD治疗的有效药物。目的:本课题目的在于探讨海蛇蛇毒抗炎活性肽Hydrostatin-SN1对IL-10基因敲除小鼠IBD疾病模型炎的抗炎活性研究,为筛选获得治疗IBD的候选药物提供研究基础。方法:1.结肠炎模型的建立:建立IL-10基因敲除小鼠自发性结肠炎模型。2.给药治疗:小鼠体重以降至初始体重的80%为准,将动物随机分组,给药治疗。根据小鼠体重计算给药剂量,同时每天观测并记录小鼠的症状和评估疾病活动指数。共为8组:正常对照组,模型对照组,阴性对照随机肽组,阳性对照SASP组,阳性对照IFX组,Hydrostatin-SN110μg/kg、50μg/kg、250μg/kg组。给药方式:模型对照组生理盐水腹腔注射,给药剂量为100μl/20 g/d。Hydrostatin-SN1组腹腔注射,给药剂量为10μg/kg、50μg/kg、250μg/kg;阴性对照随机肽组,腹腔注射,给药剂量为400μg/kg;阳性对照SASP组,灌胃给药,给药剂量为400 mg/kg;阳性对照IFX组,腹腔注射,给药剂量为5 mg/kg。正常对照组正常进食。3.取样:40天后取材,采用Real-time PCR方法检测小鼠结肠中炎症因子的基因表达量;小鼠结肠组织福尔马林固定并石蜡包埋切片后进行H&E染色,观察小鼠结肠组织的炎症情况;小鼠结肠组织福尔马林固定并石蜡包埋后切片后进行免疫组化检测TNF-α、FOXP3的表达情况。结果:研究发现,在IL-10基因敲除小鼠自发性结肠炎模型中,Hydrostatin-SN110μg/kg/d、50μg/k/d、250μg/kg/d各个治疗组和阳性对照SASP组,阳性对照IFX组的小鼠各项疾病症状均明显好于模型组,小鼠体重变化情况、结肠炎相关疾病活动指数（disease activity index,DAI）等结肠炎症状均明显好于模型对照组。其中Hydrostatin-SN150μg/kg/d剂量组的治疗效果与阳性对照组IFX相当,且阴性对照组随机肽并无疾病缓解症状;同时,Hydrostatin-SN110μg/kg/d、50μg/kg/d、250μg/kg/d各个治疗组小鼠的结肠长度、脾脏指数也有明显的缓解;其中给药剂量Hydrostatin-SN150μg/kg/d效果最好,与阳性对照组IFX相当。苏木精-伊红（HE）染色的结果表明:Hydrostatin-SN1 50μg/kg/d剂量组能显著改善结肠的炎症程度和病变范围;Real-time PCR结果证实Hydrostatin-SN1 50μg/kg/d剂量组对结肠组织中相关促炎炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ）的表达具有显著抑制效果,抑制效果和阳性对照IFX组相当。免疫组化的结果表明:Hydrostatin-SN1 50μg/kg/d剂量组可以显著降低TNF-α的表达量,促进FOXP3的表达。结论:Hydrostatin-SN1可以有效缓解IL-10基因敲除小鼠结肠炎的疾病症状。