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研究目的:抑郁症的发病率伴随生活压力和社会竞争的加重而日益升高,至今已经成为严重危害人类健康的常见的情感障碍类的疾病,但其发病机制复杂,至今仍未完全阐明。抗抑郁药物机制的研究和更有效的治疗药物的开发也进展缓慢。青春期是激素和行为发生改变的主要发展阶段,青春期抑郁症的发病机制特殊。γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）能抑制在青春期发育中起着重要作用。青春期激素水平在循环和中枢神经系统发生明显波动,特别是女性发病率明显升高,是抑郁症发病的高峰。中枢神经系统前额叶皮层（Prefrontal cortex,PFC）是主要担任多种情感认知功能的重要脑区。氯胺酮（Ketamine）的快速抗抑郁作用的相关研究和产后抑郁症发病机制的研究结果提示中间神经元对锥体神经元的抑制作用在抑郁症发病中可能起着重要的作用[1,2]。本研究在制备青春期小鼠抑郁慢性轻度不可预知应激模型（chronic unpredictable mild stress,CUMS）的基础上,应用行为学、高尔基染色、western blot和免疫荧光染色等方法观察前额叶皮层突触外γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）A型（GABAA）受体δ亚基的表达、AMPA（a-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic,AMPA）受体GluA1和GluA2亚基的表达以及中间神经元GABAA受体δ亚基的表达,并观察δ-GABAA受体特异性激动剂gaboxadol（4,5,6,7-tetrahydroisoxazole[5,4-c]pyridine-3-ol,THIP）,对上述受体亚基表达水平的影响。探讨GABAA受体δ亚基表达水平以及中间神经元的GABAA受体δ亚基表达对锥体神经元抑制作用的影响。研究方法:1.青春期小鼠抑郁模型的构建P21天的C57BL/6J小鼠分别随机分为:对照组、CUMS组和THIP+CUMS组。采用改良慢性不可预知应激刺激方法建立抑郁模型,时间持续3周,使用的应激源主要有10种,包括:水平震荡、噪声、束缚、禁水、禁食、昼夜颠倒、潮湿垫料、倾斜鼠笼、空笼饲养、陌生鼠笼等,CUMS组每天随机且不重复的应用2种应激刺激,应激源每周不同程度的增加时间。3周后进行观察,根据小鼠的糖水偏爱测试的糖水消耗百分数、强迫游泳实验和悬尾实验测试的不动时间分析小鼠是否抑郁,慢性轻度不可预知应激模型是否造模成功。2.δ-GABAA受体在GABA能抑制、AMPA受体上膜和青春期小鼠抑郁行为中的作用比较青春期小鼠制备CUMS后各组小鼠的行为学变化、前额叶树突和树突棘结构形态的变化和相关受体蛋白的表达。通过各组小鼠糖水消耗百分数、强迫游泳实验和悬尾实验的不动时间判断小鼠是否有抑郁样表现。通过高尔基形态染色比较造模前后各组小鼠前额叶神经元树突和树突棘的形态密度变化,western blot和免疫荧光染色比较造模和给药后各组小鼠GABAA受体δ亚基、AMPA受体GluA1和GluA2亚基膜蛋白和总蛋白含量的变化。3.研究THIP对青春期小鼠抑郁样行为的改善、前额叶树突和树突棘结构形态的变化以及相关受体蛋白的表达P21天的C57BL/6J小鼠分别随机分为对照组、CUMS组和THIP+CUMS组（THIP+CUMS）三组。比较青春期小鼠给THIP后,各组小鼠的行为学变化、前额叶树突和树突棘结构形态的变化和相关受体蛋白的表达。通过各组小鼠糖水偏爱实验的糖水消耗百分数、强迫游泳实验和悬尾实验的不动时间判断小鼠是否有抑郁样表现。通过高尔基形态染色比较给药后各组小鼠前额叶神经元树突和树突棘的形态密度变化,western blot和免疫荧光染色比较给药后各组小鼠GABAA受体δ亚基、AMPA受体GluA1和GluA2亚基膜蛋白和总蛋白含量的变化比较神经元功能的变化情况。研究结果:1.CUMS后,CUMS组较对照组的糖水消耗百分数（62.50±5.23,86.00±0.40）,悬尾实验的不动时间（190.40±14.13,133.20±13.00）和强迫游泳的不动时间（157.80±20.44,71.63±7.32）均有不同程度的统计学意义（P<0.05）;高尔基染色检测前额叶皮层神经元基底（6.30±0.53,12.32±0.89）和顶端（6.33±0.70,11.97±0.79）树突棘的数量均有统计学差异（P<0.05）;GABAA受体的δ亚基（1.053±0.03744,1.437±0.04870）以及AMPA受体的GluA1（1.145±0.3500,3.128±0.2941）和GluA2亚基（0.6397±0.3078,1.409±0.05413）的膜蛋白表达含量均有不同程度的统计学意义（P<0.05）;GABAA受体的δ亚基（1.518±0.03955,1.451±0.05966）以及AMPA受体的GluA1（1.168±0.01066,1.190±0.03391）和GluA2亚基（1.202±0.03242,1.216±0.02648）的总蛋白表达含无统计学意义（P>0.05）;免疫荧光染色检测GABAA受体的δ亚基荧光强度（47.64±1.164,61.74±3.102）有统计学差异（P<0.05）。2.CUMS后,给THIP后,THIP+CUMS组和CUMS组相比较糖水偏爱测试（83.36±1.46,62.50±5.23）、悬尾实验的不动时间（130.4±10.69,190.40±14.13）和强迫游泳的不动时间（59.28±7.03,157.80±20.44）均有不用程度的统计学意义（P<0.05）;高尔基染色检测前额叶皮层神经元基底（10.56±0.44,6.30±0.53）和顶端（12.60±0.81,6.33±0.70）树突棘的数量均有统计学差异（P<0.05）;GABAA受体的δ亚基（1.479±0.02685,1.518±0.03955）以及AMPA受体的GluA1（1.168±0.01066,1.174±0.01212）和GluA2亚基（1.202±0.03242,1.191±0.03420）的总蛋白表达含无统计学意义（P>0.05）;GABAA受体的δ亚基（1.517±0.05973,1.053±0.03744）以及AMPA受体的GluA1（3.453±0.1897,1.145±0.3500）和GluA2亚基（1.513±0.02358,0.6397±0.3078）的膜蛋白表达含量均有不同程度的统计学意义（P<0.05或P<0.01或P<0.001）;免疫荧光染色检测GABAA受体的δ亚基荧光强度（56.54±1.371,47.64±1.164）有统计学差异（P<0.05）。结论:1.对照组和CUMS组的小鼠抑郁样行为学表现有明显差异,应用慢性不可预知应激模型的方法,青春期小鼠抑郁样模型造模成功。造模后,前额叶皮层的神经元树突棘密度减少、GABAA受体的δ亚基以及AMPA受体的GluA1和GluA2亚基的膜蛋白表达明显减少,免疫荧光染色检测GABAA受体的δ亚基荧光强度明显减少,提示GABAA受体的δ亚基使中间神经元兴奋性增加,从而对锥体神经元的抑制作用增强,锥体神经元去极化作用减弱,抑制Ca2+内流,降低AMPA受体的GluA1和GluA2亚基的磷酸化,从而上膜减少,使突触可塑性发生改变,可能导致青春期抑郁症的发生。2.应用THIP作用于青春期抑郁小鼠,其行为学SPT明显增加,TST和FST的不动时间明显减少、前额叶皮层神经元树突棘密度明显增加、GABAA受体的δ亚基以及AMPA受体的GluA1和GluA2亚基的膜蛋白表达明显增加,免疫荧光染色检测GABAA受体的δ亚基荧光强度明显增加,提示GABAA受体的δ亚基增加使中间神经元兴奋性降低,从而对锥体神经元的抑制作用减弱,锥体神经元去极化作用增强,使Ca2+内流增加,促使AMPA受体的GluA1和GluA2亚基的磷酸化,从而上膜增加,改善突触可塑性,使青春期小鼠抑郁样行为改善。