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该实验分三部分内容:第一部分:Ca<2+>运动对α<,1>-AR引起内源性C1C-3氯通道表达的影响;该实验在血管平滑肌细胞系A10细胞(胚胎鼠胸主动脉平滑肌细胞系)上用RT-PCR,Western blot的方法检测α<,1>-AR触发的内源性C1C-3氯通道mRNA和蛋白的表达,并用不同的Ca<2+>通道阻断剂研究了经VDCC和ROCC的Ca<2+>内流在C1C-3氯通道表达中的作用.小结:1.A10细胞上有内源性C1C-3蛋白表达,分子量为80-90kDa.2.激活α<,1<->>AR触发ROCC的Ca<2+>内流,引起[Ca<2+>]i持续升高,使 酪氨酸发生磷酸化,促进了C1C-3氯通道的表达.3.ROCC和SOCC的Ca<2+>内流均参与了A10细胞上C1C-3氯通道表达 的调节,而VDCC的Ca<2+>内流未参与以上过程.第二部分:C1C-3氯通道对α<,1A<->>、α<,1B<->>AR亚型触发的Ca<+>运动的影响;该实验以转染了两种α<,1A<->>AR亚型(α<,1A<->>、α<,1B<->>)cDNA的HEK293细胞(分别表示为α<,1A<->>HEK293、α<,1B<->>HEK293)为模型,用C1C-3反义寡核苷酸抑制C1C-3氯通道蛋白的表达,以ROCC阻断剂SK&F96365和对C1C-3氯通道有阻断作用的DIDS为工具药,探讨了C1C-3氯通道在α<,1A<->>、α<,1B<->>AR不同亚型触发的Ca<2+>内流中的作用.小结:1)HEK293、α<,1A<->>HEK293、α<,1B<->>HEK293细胞上有内源性C1C-3氯通道蛋白表达,分子量为80-90kDa.C1C-3反义寡核苷酸可抑制C1C-3蛋白的表达.2)C1C-3氯通道参与了SOCC和α<,1A<->>、α<,1B<->>AR触发的ROCC的Ca<2+>内流调控.它参与SK&F96365敏感的SOCC和α<,1A<->>、α<,1B<->>AR触发的ROCC的Ca<2+>内流程度相同.3)C1C-3氯通道参与了DIDS敏感的ROCC和SOCC的Ca<2+>内流调控.参与α<,1B<->>AR触发的Ca<2+>内流的氯通道是C1C-3氯通道,参与SOCC和α<,1A<->>AR触发的ROCC Ca<2+>内流的氯通道,除C1C-3氯通道外,可能还有其它氯通道.第三部分:C1C-3氯通道对ET-1引起的VSMCs增殖的影响;该实验用反义寡核苷酸特异性地抑制C11C-3氯通道蛋白的表达,用[<3>H]-胸腺嘧啶掺入法检测大鼠胸主动脉平滑肌细胞的增殖,研究C1C-3氯通道对ET-1诱导的VSMCs增殖的影响.小结:1)大鼠胸主动脉平滑肌细胞上有内源性C1C-3氯通道蛋白表达,分子量为80-90kDa.ET-1可诱导C1C-3氯通道蛋白的表达.2)C1C-3反义寡核苷酸可抑制ET-1诱导的血管平滑肌细胞C1C-3氯通道蛋白的表达,和抑制血管平滑肌细胞的增殖,说明C1C-3氯通道参与了VSMCs增殖功能的调节.