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为研究不同品种猪骨骼肌卫星细胞迁移和粘附差异的分子机制,本试验以华南地方品种蓝塘猪和外来品种长白猪背最长肌的骨骼肌卫星细胞为试验材料,利用细胞划痕试验和transwell小室迁移试验,比较两品种猪骨骼肌卫星细胞的迁移能力;细胞外基质(Fn)-细胞粘附试验,比较两品种猪骨骼肌卫星细胞的粘附能力;运用细胞免疫荧光技术,检测两品种猪骨骼肌卫星细胞粘着斑和F-肌动蛋白的表达;采用Western blot技术,检测两种卫星细胞迁移24 h和粘附2 h时间点FAK/paxillin信号通路的蛋白表达情况,结合实时荧光定量PCR技术检测两种卫星细胞粘附2 h时整合素(ITGB)关键基因的表达;同时以蓝塘猪骨骼肌卫星细胞为材料,选用p-FAK特异性抑制剂PF-573228,分别以0、5和10μmol/L浓度处理蓝塘猪骨骼肌卫星细胞24 h,检测其对卫星细胞迁移和粘附的影响,以及粘着斑、F-肌动蛋白和FAK信号通路相关蛋白的表达变化。试验结果如下:(1)细胞划痕试验和transwell小室迁移试验表明,蓝塘猪骨骼肌卫星细胞的迁移能力显著强于长白猪骨骼肌卫星细胞(P<0.05);细胞外基质-细胞粘附试验表明,蓝塘猪骨骼肌卫星细胞的粘附能力显著强于长白猪骨骼肌卫星细胞(P<0.05)。(2)细胞免疫荧光结果表明,相比于长白猪骨骼肌卫星细胞,蓝塘猪骨骼肌卫星细胞的粘着斑表达更丰富,而F-肌动蛋白的表达量更低。(3)蓝塘猪骨骼肌卫星细胞在迁移24 h的p-FAK(Tyr397)和p-paxillin(Tyr118)蛋白表达显著高于长白猪骨骼肌卫星细胞(P<0.05);蓝塘猪骨骼肌卫星细胞在粘附2 h的p-FAK(Tyr397),p-paxillin(Tyr118)和p-Akt(Ser473)蛋白表达显著高于长白猪骨骼肌卫星细胞(P<0.05),粘附基因ITGB3存在差异的趋势(P=0.053)。(4)以10μmol/L PF573228浓度处理蓝塘猪骨骼肌卫星细胞24 h,能显著抑制p-FAK(Tyr397)的蛋白表达;且5和10μmol/L PF-573228处理能显著抑制骨骼肌卫星细胞的迁移能力(P<0.05),骨骼肌卫星细胞在10μmol/L PF-573228处理浓度下,细胞粘附能力受到抑制(P<0.05)。(5)与对照组相比,PF-573228以5和10μmol/L浓度处理卫星细胞能降低粘着斑的数量,抑制p-paxillin(Tyr118)和p-Akt(Ser473)的蛋白表达(P<0.05),不影响F-肌动蛋白的变化。以上结果说明:蓝塘猪和长白猪骨骼肌卫星细胞迁移和粘附的差异与粘着斑和F-肌动蛋白的形成密切相关,FAK/paxillin信号通路可能参与两品种骨骼肌卫星细胞迁移和粘附差异的调控。