目的基于网络药理学和体外细胞实验探究鸦胆子对非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移的影响。方法1.利用网络药理学分析技术对天然药物鸦胆子的成分及成分靶点筛选比较,得到鸦胆子发挥抗癌活性可能的作用机制。首先通过中药系统药理学数据库分析获取鸦胆子有效成分及其相关抗肿瘤靶点,同时利用Gene Cards数据库获得鸦胆子治疗非小细胞肺癌的潜在靶点,再将这两数据库借助String在线平台构建鸦胆子抗肿瘤靶点的蛋白相互作用网络并对潜在作用靶点进行分析,将筛选得到的潜在靶点通过DAVID V6.8数据库获得GO/KEGG通路富集分析结果并对筛选到的关键靶点进行基因表达差异分析、预后分析、免疫浸润分析。2.利用多种体外细胞实验验证网络药理学的分析结果,进一步说明鸦胆子发挥抗癌作用可能作用机制。首先采用MTT实验测鸦胆子对非小细胞肺癌细胞增殖的影响,同时利用细胞划痕实验检测细胞迁移变化后,Western blot检测P53、P21、MDM2蛋白表达水平、流式细胞术检测细胞周期、Annexin V-FITC/PI双染法测不同鸦胆子浓度BJOE处理下的细胞凋亡水平。在此基础上,继续探究鸦胆子是否对化疗药物对癌症治疗产生积极的影响,于是通过MTT实验检测鸦胆子、顺铂分别单独应用与两者联合应用时细胞增殖活力变化;流式细胞仪检测鸦胆子与顺铂单独应用与联合应用时细胞凋亡数变化。结果1.鸦胆子发挥功能的生物活性成分有15个,包括β-谷甾醇、木犀草素、鸦胆子苷A、鸦胆子苦醇、鸦胆子苷B、鸦胆子苷H、鸦胆子苷I、鸦胆子苷J、鸦胆子苷L、鸦胆子苷M、鸦胆子P、鸦胆子苷C-qt、鸦胆子苷D、鸦胆子苷B、鸦胆子苷C。鸦胆子治疗非小细胞肺癌潜在靶点包括P53、EGFR、CDKNIA、CCND1、MAPK1、AKT1,其中对非小细胞肺癌患者预后影响最大靶点为P53。鸦胆子通过多种信号通路发挥抗肿瘤作用,包括调控细胞周期、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡及免疫调控等。2.BJOE能抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移。可能是通过减少P53蛋白的泛素化水平上调P21蛋白表达,来抑制细胞周期的进程,以此抑制非小细胞肺癌细胞系A549和PC-9细胞的增殖水平。并且该药物与化疗药物在治疗非小细胞肺癌方面具有协同作用。结论鸦胆子可能通过抑制P53的泛素化降解水平,促进P21蛋白表达水平后阻滞了细胞周期的进程来抑制非小肺癌细胞的细胞增殖和迁移,并且鸦胆子与化疗药物顺铂在治疗肿瘤方面具有协同作用。