加味玉屏风散对反复呼吸道感染小鼠BALF中SIgA、HBD-2影响的实验研究

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目的:本课题旨在研究加味玉屏风散对实验性肺脾气虚证反复呼吸道感染小鼠,通过观察其支气管肺泡灌洗液(BALF)中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、人β-防御素2(HBD-2)含量水平的影响,探讨其作用机制,评价其对肺脾气虚证小鼠反复呼吸道感染治疗作用,为加味玉屏风散的临床应用与推广提供理论依据,并为进一步研制相关的中药成药提供依据。  方法:在无差别的条件下,先将50只清洁级的体重约为18-22g的6-8周龄、雌雄各半的小鼠适应性喂养5天,按数字表法随机分成5组,每组10只,分别为正常对照组,肺脾气虚模型组,胸腺肽组,加味玉屏风散低剂量组和加味玉屏风散高剂量组。从实验第6天开始造模,方法如下:除正常对照组常规喂养外,其余四组小鼠每日上午置于0.5立方米烟箱内,用香烟烟熏,连续2支,每支香烟约燃烟10分钟,两支香烟之间间隔5分钟,每周连续6天,停1天。实验在室温(20℃~25℃)中进行,造模期60天。并于造模开始后第30、32、34、36天给以上四组小鼠木瓜蛋白酶雾化吸入,具体方法如下:每次将5只小鼠放入一40×40×40cm的与超声波雾化器相连的雾化箱中,通过雾化管向箱中喷入浓度为0.3%的木瓜蛋白酶,每次雾化量2ml。造模第20天开始,冰冷的番泻叶浸液按0.125g/lml/100g的剂量给小鼠灌胃,每日1次,持续30天。各组除施加以上因素处理外,其日常饲养方法均相同。实验过程中,注意观察各组小鼠的一般情况,包括:体重、精神、活动、反应、皮毛色泽及脱落情况,进食多少、大便质地等。如造模小鼠出现反应迟钝、少动、精神萎靡、行动迟缓、消瘦、皮肤弹性差、毛发零乱、脱落、缺少光泽,并出现气短、气急、乏力等肺气虚症状,以及纳食减少、大便溏薄、困倦等脾气虚的症状,说明造模成功。于造模成功后第1d开始,空白对照组不造模不喂药,其余4组均造模成功后第1d开始,每日分别称重,按照lml/100g体重/天的剂量给小鼠灌胃。通过检测小鼠BALF中SIgA、HBD-2水平变化来观察加味玉屏风散的治疗效果。  结果:加味玉屏风散高、低剂量组及胸腺肽组均能改善模型小鼠的症状,以中药高剂量组及胸腺肽组更为明显。小鼠BALF中的SIgA、HBD-2水平高于肺脾气虚证模型组(P<0.05);中药高、低剂量组及胸腺肽组均能升高小鼠BALF中的SIgA、HBD-2水平,和模型组比较均有差异(P<0.05),中药高剂量组与胸腺肽组相比,没有显著的差异(P>0.05),两组疗效相当;中药高剂量组及胸腺肽组分别与低剂量组相比,有差异(P<0.05),中药大剂量组及胸腺肽组优于小剂量组。  结论:“加味玉屏风散”可以改善肺脾气虚证反复呼吸道感染小鼠的症状,提高免疫功能,调节实验小鼠BALF中SIgA、HBD-2的含量水平。
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