60Co-γ诱变白三叶的抗旱和抗病研究

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白三叶是一种分布范围广、适应性强、利用价值很高的优质牧草,对土壤的要求不严,耐湿、耐贫瘠、耐寒,但在干旱环境下生长较差,加之白三叶病害发生严重,大大地限制了其种植和推广。近年来,随着诱变技术的逐渐成熟,诱变育种越来越受到人们的关注和重视。本试验采用离体筛选、盆栽筛选的方法,对60Co-γ诱变白三叶进行抗旱突变体和抗病突变体的筛选与鉴定,研究了干旱胁迫对白三叶诱变材料株高、根长、地上(地下)生物量、叶绿素、叶片保水力、相对含水量、质膜透性、Pro、可溶性糖、SOD、POD、MDA的影响;以及白粉菌对两个品种白三叶诱变材料的不同影响。主要研究结果如下:1.以甘露醇为选择剂,对60Co-γ诱变白三叶瑞文德品种的4份材料进行抗旱突变体的离体筛选,确定4份材料对甘露醇的适宜浓度、半致死浓度和致死浓度。然后对筛选获得的突变体进行鉴定,通过测定株高、根长、生物量、叶绿素、丙二醛、脯氨酸、SOD、POD,比较诱变材料与未诱变材料抗旱性的差异,采用标准差赋予权重法对4份材料的抗旱性进行综合评价,并对9个抗旱指标进行主成分分析。试验结果如下:诱变材料20Gy和80Gy对甘露醇具有比未诱变材料0Gy更高的半致死浓度和致死浓度。通过4份材料的抗旱性综合评价可知,4份材料的抗旱性由强到弱依次为:20Gy>90Gy>80Gy>0Gy,诱变材料的抗旱性均强于未诱变材料。通过主成分分析后可知,9个抗旱指标综合成3个综合指标,这3个综合指标代表了原来9个抗旱指标96.6%的信息,第一个综合指标主要包括地上生物量、脯氨酸和SOD;第二个综合指标主要包括株高、地下生物量、丙二醛、POD;第三个综合指标主要包括叶绿素。2.以盆栽的方式,对生长了64d左右的60Co-γ诱变白三叶海发品种扦插苗进行持续干旱处理21d,通过测定地上(地下)鲜重、地上(地下)干重、叶绿素、相对含水量、叶片保水力、丙二醛、电导率、可溶性糖、脯氨酸,比较诱变材料与未诱变材料抗旱性的差异,采用标准差赋予权重法对材料的抗旱性进行综合评价,并对11个抗旱指标进行主成分分析。试验结果如下:筛选后,120份诱变材料中共得到97个突变体。处理组的地上(地下)鲜重、地上(地下)干重、叶绿素、相对含水量低于对照组,叶片保水力、丙二醛、可溶性糖、脯氨酸、电导率均高于对照组。材料间除了在叶绿素和叶片保水力两个指标下差异不显著外,在其他指标下均差异显著(P<0.05)。通过综合评价后可知,共有41份诱变材料的综合评价值大于未诱变材料Ⅲ,说明这41份材料的抗早性强于材料Ⅲ,并筛选出4份极端抗旱材料,分别为Ⅲ40-1、Ⅲ70-2、Ⅲ70-3、Ⅲ70-5。对材料11个抗旱指标进行主成分分析后,提取出3个成分,这3个成分代表了原来11个抗旱指标85.23%的信息,第一个主成分主要包括地上(地下)鲜重、地上(地下)干重;第二个主成分主要包括叶绿素;第三个主成分主要包括电导率。3.以盆栽的方式,对生长了64d左右的60Co-γ诱变白三叶海发品种和克尔利卡诺瓦品种扦插苗进行人工接种白粉菌,发现海发品种的病情指数在30.18%~62.16%,其中未诱变材料Ⅲ的病情指数为62.05%,除Ⅲ3-10的病情指数大于材料Ⅲ外,大部分诱变材料的病情指数均低于材料Ⅲ。克尔利卡诺瓦品种的病情指数在72.58%-81.31%,其中未诱变材料V的病情指数为75.83%,有5个材料的病情指数小于材料V,分别为Ⅴ20-1、Ⅴ20-2、Ⅴ20-3、Ⅴ20-4、Ⅴ20-10。与海发品种相比,克尔利卡诺瓦品种的病情指数均≥72%,说明克尔利卡诺瓦品种更容易被白粉菌侵染,该品种的白粉病发生更为严重。
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