原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞对体外脂多糖刺激的反应

来源 :中国协和医科大学(北京协和医学院) 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:puzz777
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研究目的:通过观察外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclea cells,PBMCs)在体外分泌细胞因子的特点,和在LPS刺激以后细胞因子分泌水平的变化,初步探讨LPS、PBMCs以及细胞因子在PBC发病机制中的作用。 研究方法: 采集21例PBC患者,8例原发性干燥综合征(Primary Sjogren’s Syndrome,PSS)患者,11例健康成人的抗凝静脉血,分离PBMCs;除其中9例PBC患者的PBMCs为冻存复苏外,其余标本均为新鲜采集。将所得细胞分别置于RPMl1640完全培养基中和含有终浓度为0.01mg/ml LPS的RPMl1640完全培养基中培养24小时,收集上清液,用ELISA方法测量其中细胞因子的浓度。用新鲜采集的6例PBC患者和3例正常人PBMCs,分别给予浓度为0.01mg/ml、0.1mg/ml和1mg/ml LPS的刺激,于12、24和48小时收集上清液,用ELISA方法检测IFN-γ。 研究结果: 在无刺激体外培养24小时的PBMCs上清液中,PBC患者组的IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α的水平都有高于正常对照组的趋势;其中IL-2的升高有统计学显著性意义(p<0.05)。在0.01mg/ml LPS体外培养24小时的PBMCs上清液中,PBC患者组的IL-1β、IL-2和TNF-α的水平都明显高于正常对照组(p<0.05)。从变化幅度比较,PBC患者IL-1β升高幅度明显高于正常对照组(p<0.05),IL-2的降低幅度与正常对照有显著性差异(p<0.05)。PBC组与PSS组比较,仅0.01mg/ml LPS刺激后的IL-6水平有明显升高(p<0.05)。IFN-γ在PBMCs上清液中几乎检测不到。新鲜提取的PBMCs和液氮冻存后复苏的PBMCs相比,在体外对LPS刺激的反应有明显的差异。 结论: PBC患者的PBMCs在体外无刺激条件下,和受LPS刺激后,分泌细胞因子的特点与正常对照组之间存在差异。液氮冻存的PBMCs细胞复苏后的活性与新鲜提取的PBMCs有明显差异。
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