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目的:下颌下腺是一个具有内分泌和外分泌双重功能的器官,能表达多种生物活性物质。三叶因子家族三个成员均可在下颌下腺合成、分泌。三叶因子家族在损伤后的黏膜修复与重建过程中有重要的作用。下颌下腺TFF家族的TFF2,TFF3均参与大鼠实验性胃溃疡愈合的调节,作为三叶因子家族之一的TFF1在人下颌下腺已有报道。本文正是为了探讨下颌下腺TFF1在实验性胃溃疡大鼠下颌下腺中的表达、变化及意义。
方法:采用冰乙酸复制大鼠实验性胃溃疡模型,实验分为:实验性胃溃疡组(溃疡组)、盐水对照组(盐水组),正常组。溃疡组和盐水组分别于造模后1、2、4、6、10、14、23天取材,以免疫组织化学染色检测溃疡组、盐水组和正常组大鼠下颌下腺TF目的表达定位及变化;RT-PCR检测下颌下腺TFF1 mRNA的转录情况。
结果:
1.成功获得大鼠胃溃疡模型,造模稳定的成功率高。
2.免疫组织化学染色及图像分析结果:
2.1免疫组化SP法显示正常大鼠下颌下腺颗粒曲管有TFF1阳性细胞,主要分布在多颗粒细胞,颗粒曲管(GCT)管腔也可见TFF1阳性物质。分泌管管腔游离面可见线条状TFF1阳性物。溃疡组不同时间分泌管,小叶间导管管腔内TFF1阳性物质增多,游离面更为明显。盐水组1~4天下颌下腺各种管道阳性物质较正常组明显。
2.2胃溃疡愈合过程中下颌下腺TFF1多肽的变化
大鼠实验性胃溃疡形成和愈合过程中下颌下腺TFF1肽的表达发生了量的变化。正常组:下颌下腺仅少量表达TFF1肽,积分光密度值4.76;盐水对照组:TFF1在术后1~4d表达量略有增加,1d组与正常对照组比较P<0.05,其余时间下颌下腺TFF1肽的积分光密度与正常对照组无明显区别(P>0.05);溃疡组下颌下腺TFF1肽积分光密度值明显增加,高于相应的盐水对照组和正常组(P<0.05或P<0.01),其中1d,2d,4d,TFF1肽积分光密度值逐渐增加,6d最高,10d,14d,23d也显著高于盐水对照组P<0.05 or P<0.01)。
2.3 RT-PCR法检测各组下颌下腺TFF1 mRNA表达
下颌下腺有TFF1 mRNA转录,在正常组和盐水对照组呈低水平表达;溃疡组TFF1/GAPDH mRNA光密度比值在溃疡2~23d均高于盐水对照组和正常组(P<0.01,或P<0.05)。
结论:
1.大鼠下颌下腺可表达TFF1 mRNA和多肽,且定位于腺颗粒曲管。
2.下颌下腺TFF1肽在大鼠实验性胃溃疡形成和愈合过程中高表达,且可能主要通过导管系统排泄,发挥促进溃疡愈合的作用。