恶性肿瘤的持续生长、侵袭转移与肿瘤血管生成密切相关，在这个过程中整合素αvβ3起着重要的作用。αvβ3主要通过和ECM中的一些含RGD的三肽序列配体结合发挥作用，文献报道其在新生血管内皮细胞有强烈表达，而在正常细胞表达极少或缺乏，因此，放射性标记合成的RGD拮抗肽作为高特异性的标记物对恶性肿瘤的早期诊断和治疗具有重要意义。 目的：探讨99Tcm直接法标记RGD-4CK的最佳条件及其体外稳定性，研究99Tcm-RGD-4CK在正常及荷瘤小鼠的体内生物分布。 方法：采用99Tcm直接预锡化法标记RGD-4CK，较为系统地研究了RGD-4CK用量，抗坏血酸用量，酒石酸亚锡用量，预锡化前反应介质PH，预锡化温育时间，99TcmO4-淋洗液体积，99Tcm标记反应温度及时间等标记条件对标记率的影响；应用ITLC-SG硅胶纸层析法测定标记率及放射化学纯度,正常小鼠体内生物分布试验：经小鼠尾静脉注射200μl(370KBq)99Tcm-RGD-4CK溶液，在5min至4h内不同时相点断头处死，采取全血及主要脏器，称重并测量放射性计数，并计算每克组织百分注射剂量率(％ID/g),荷瘤小鼠体内生物分布试验及竞争分布试验：分直接注射标记肽组及受体封闭抑制试验组(即预注射未标记肽150μg后30min再注射标记肽的对照组)。两组均经尾静脉注入200μl(370KBq)99Tcm-RGD-4CK，分别于注射标记肽后1、2、4h处死，计算主要组织及肿瘤％ID/g以及肿瘤与感兴趣组织的T/NT比值，并计算未标记肽对肿瘤摄取的抑制率。 结果：99Tcm-RGD-4CK的制备：采用预锡化方法能实现99Tcm对RGD-4CK直接标记，不同的标记条件对标记率有明显的影响。本试验的最佳标记条件为：抗坏血酸500μg，酒石酸亚锡250μg，预锡化前反应介质PH3.0，室温下预锡化温育6h，99TcmO4-18.5MBq(体积＜100μl)，标记反应温度90℃，反应时间30min。标记率92％～95％，室温下放置4h后放射化学纯度仍＞90％，放置6h为86.2％±1.7％,99Tcm-RGD-4CK小鼠体内的分布：血液清除迅速，从5min的7.29±0.64下降为2h的0.72±0.08，减少了90.1％；肝、肾放射性分布较高，尤以肾明显，其次是脾、肠、肺。肾脏放射性下降较快，40min时已降为5min时的54.9％；脑分布持续呈低水平,99Tcm-RGD-4CK在荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠主要脏器分布与正常小鼠相似，而在1、2、4h肿瘤组织内％ID/g分别为1.64±0.13、1.94±0.09、2.31±0.22；直接注射标记肽组T/NT在4h达最大，在血液、肌肉、肺、脑分别为5.97±1.07、6.92±2.29、8.27±1.93、19.62±5.07。对照组分别为2.49±0.31、2.89±0.82、2.08±0.61、7.21±1.28。预注射RGD-4CK肽的对照组(受体封闭抑制试验组)在1、2、4h抑制率分别为57％，66％及69％ 结论：本研究初步建立了预锡化直接标记法制备99Tcm-RGD-4CK的最佳标记条件，标记率可达92％～95％，标记物体外稳定性好，能满足显像要求。为今后其它含二硫键环形多肽的99Tcm直接法标记奠定了基础,99Tcm-RGD-4CK血液清除迅速，主要经泌尿系统排泄，肌肉、肺、肠道放射性分布呈低水平，脑放射性呈持续低水平，提示该标记物不能透过正常血脑屏障。为下一步显像研究获得脑、胸、肺部低本底，高质量的图像提供了依据,99Tcm-RGD-4CK在荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠肿瘤组织有较高的％ID/g，肿瘤与肌肉、肺、脑的T/NT比值4h最高，分别为6.92、8.27与19.62，如此高的T/NT比值能满足肿瘤受体显像研究的要求,非标记RGD-4CK以时间依赖方式明显抑制肿瘤对99Tcm-RGD-4CK的摄取，4h抑制率达69％，提示肿瘤组织与99Tcm-RGD-4CK的结合具有受体依赖性，表明该标记肽与未标记肽具有相同的生物学活性,上述结果为进一步的受体显像研究奠定了坚实的基础。