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苜蓿褐斑病是由苜蓿假盘菌[Pseudopeziza medicaginis(Lib.)Sacc]引致的叶部病害,是苜蓿生产中分布广、危害严重的病害之一。苜蓿假盘菌子囊孢子作为初侵染源在条件合适时侵入寄主,首先侵染植株下部叶片,以后由感病叶片产生子囊孢子进行再侵染。苜蓿褐斑病菌的侵染和流行,严重影响苜蓿的产量和品质。本研究通过对苜蓿假盘菌病原的分离,不同营养物质、温度、光照对苜蓿假盘菌子囊孢子萌发及苜蓿假盘菌侵入寄主的超微结构观察,得出如下结论:
(1)运刚子囊盘分离法可以分离出苜蓿假盘菌纯菌株,其中最佳灭菌时间为酒精2.5分钟、升汞3分钟。
(2)通过不同C、N源对孢子萌发和芽管生长试验影响,明确了蔗糖、硫酸铵、硝酸钾、尿素均有利于孢子的萌发,而可溶性淀粉、硝酸铵、碳酸铵、氨基乙酸、蛋白胨、草酸铵则不利于孢子的萌发;从芽管生长速率看,蔗糖>可溶性淀粉>麦芽糖>葡萄糖>水琼脂,蛋白胨>尿素>硫酸铵>硝酸钾>硝酸钠>草酸铵>碳酸铵>CK>硝酸铵>氨基乙酸。说明,孢子的萌发需要充足的水分即可,而芽管的生长则需要充足的营养物质支撑。
(3)通过不同培养基对孢子萌发、芽管生长试验,明确了OA培养基上孢子的萌发率最高,其次是PDA、Vm和SA培养基;SA、PCA、TA、Q4适宜芽管的伸长生长,而Vm、PDA、V8、 Zb、OA、M不适宜假盘菌孢子芽管的伸长生长。从不同培养基对苜蓿假盘菌产楹试验可知:SA培养基的产盘率最高,比对照V8CaCO3高33%;而Vm、PDA、OA、M、TA、Q4的产盘率均比对照低,PSA、PCA、Zb不产盘。
(4)通过温度和光照对苜蓿假盘菌子囊孢子萌发实验,明确了苜蓿假盘菌在25℃孢子萌发率最好且黑暗条件下的芽管长度明显高于光照条件下的芽管长度。
(5)通过扫描电镜的观察,明确了苜蓿假盘菌以直接侵入的方式侵入寄主组织。