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背景NK/T细胞淋巴瘤（Natural Killer T-Cell Lymphoma,NKTCL）是非霍奇金淋巴瘤的一个亚型,在中国的发病率远高于西方国家。NKTCL是一类具有特殊形态、免疫表型和生物学行为的肿瘤,具有高度侵袭性,病程进展快等特点。尤其是复发难治NK/T细胞淋巴瘤,其发病机制和驱动因素尚不明确,亦无标准治疗方案,传统治疗手段疗效及预后较差。研究表明肿瘤细胞通过PD-L1/PD-1通路传递负性调控信号诱导免疫耐受,促使免疫逃逸,是NKTCL疗效及预后差的原因之一。随着免疫系统在肿瘤发生和发展中的作用被逐步揭示,以免疫检查点阻断剂和过继细胞治疗为主的免疫治疗在肿瘤的治疗中显示了巨大的潜力。PD-L1在NKTCL的研究报道非常有限。少数研究发现,PD-L1不仅表达在HL细胞株而且在肿瘤组织中亦是高表达;此外,PD-L1在侵袭性强的淋巴瘤,如弥漫大B细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤,其PD-L1表达率高于滤泡型淋巴瘤、结节硬化型霍奇金淋巴瘤等惰性淋巴瘤,在正常淋巴结组织中未检出PD-L1的表达PD-L1在NKTCL肿瘤组织中的表达阳性率为60%,明显高于正常组织;PD-L1不仅在肿瘤细胞也在肿瘤相关巨噬细胞的胞质和胞膜表达,而PD-1主要表达在肿瘤间质淋巴细胞的胞质和胞膜。NKTCL组织中PD-L1的表达与肿瘤浸润T淋巴细胞（TIL）的分布呈负相关;PD-L1的表达水平与分期、LDH和Ki-67水平均呈正相关,而与IPI评分呈负相关。这些研究结果提示在NKTCL微环境中肿瘤细胞可能通过PD-L1/PD-1途径抑制TIL活性或促进其凋亡,最终导致淋巴瘤细胞的免疫逃逸,然而引起PD-L1的表达增高的因素尚不清楚。相关文献表明,染色体9p24.1区域及JAK-STAT通路与经典型霍奇金淋巴瘤（cHL）及原发纵隔的大B细胞淋巴瘤（PMLBCL）中PD-L1的高表达有关。JAK2基因是JAK家族（包括JAK1、JAK2、JAK3和非受体蛋白酪氨酸激酶2）的成员之一,JAKs与造血细胞中对信号转导起到重要作用的各种跨膜细胞因子和生长因子受体的胞质部分相关。活化的JAK2已经成为骨髓增生性疾病的重要靶点,并且逐渐在实体瘤中起到越来越重要的作用。本实验欲探究NK/T细胞淋巴瘤中是否也存在类似机制。目的1.对应用PD-1抑制剂pembrolizumab的7例复发难治NK/T细胞淋巴瘤患者进行临床回顾性分析,主要评估pembrolizumab对该病的有效性和安全性。2.通过NK/T细胞淋巴瘤的细胞系SNK-6及YTS来初步探讨NKTCL肿瘤细胞上PD-L1表达的影响因素。资料和方法1.收集郑州大学第一附属医院淋巴瘤诊疗中心收治的应用pembrolizumab的复发/难治的7例NK/T细胞淋巴瘤患者的资料,回顾性分析药物的有效性及安全性。2.细胞培养:细胞株培养于完全培养基,并放置于相对湿度95%,温度为37℃、含有5%CO2的培养箱中进行培养,每2-3天根据细胞状况更换或者添加适量培养液。3.对正常NK细胞以及NK/T细胞淋巴瘤细胞系SNK-6和YTS进行全基因组测序及生物信息学分析。4.应用JAK2抑制剂后,Western Blot法检测PD-L1及JAK2-STAT3通路相关蛋白的表达情况。结果1.7例患者应用pembrolizumab的中位数为4（2-18）周期。总有效率（ORR）为57.1%,2例患者（28.6%）达到完全缓解（Complete Response）,2例患者（28.6%）部分缓解（Progressive Response）。多数不良事件为I-II级,安全性好。2.与正常NK细胞相比,SNK-6、YTS细胞中9p24.1区域扩增占优势,应用JAK2抑制剂后JAK2-STAT3通路相关蛋白表达降低,PD-L1表达降低。结论1.每3周100mg的pembrolizumab在治疗复发难治NK/T细胞淋巴瘤方面具有一定的有效性,且由于药物引起的不良反应可以耐受。2.NKTCL细胞系中9p24.1区域扩增,JAK2-STAT3通路受到抑制可能直接或间接地使NKTCL中PD-L1表达减低。