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鲨烯合酶(squalene synthase，SQS or SS)催化两分子的法尼基焦磷酸(FPP)缩合产生鲨烯，而鲨烯的合成是类异戊二烯中央代谢途径进入三萜、甾醇等代谢支路的分支点。由于植物甾醇和三萜具有重要的保健和生理功能，因而，鲨烯合酶的研究倍受重视。本研究采用cDNA末端快速扩增技术，首次从葡萄的叶片中分离克隆出鲨烯合酶基因，对该基因进行了序列分析。并构建了该基因的原核表达载体，成功的在BL21中表达出预期蛋白。具体结果如下：1、基因克隆：用Trizol试剂从葡萄叶片中提取总RNA，根据不同植物SQS基因同源性较高的区域设计特异引物，利用RT-PCR技术获得957bp的葡萄SQS基因的保守序列；再以此序列为依据设计特异引物，利用RACE技术获得葡萄SQS基因的全长cDNA(1595bp)，并命名为VvSQS。VvSQS包含一个完整的开放阅读框(1242bp)，编码413个氨基酸残基，推导出的肽链分子量约为47.3kDa。2、序列分析：葡萄SQS基因全长cDNA与三七(Panax notoginseng)、人参(Panax ginseng)、甘草(Glycyrrhiza uralensis)SQS基因分别有82％、82％、82％的同源性；在氨基酸水平上，，葡萄SQS与三七(Panax notoginseng)、人参(Panax ginseng)、甘草(Glycyrrhiza uralensis)的SQS分别有84％、83％、84％的一致性和91％、92％、91％的相似性。综上所述，推测VvSQS具有鲨烯合酶基因的功能。3、原核表达：将鲨烯合酶基因的编码序列插入到原核表达载体pET-28a(+)中，构建了重组原核表达载体pET-SQS，转化到表达宿主菌BL21中，经IPTG诱导后，SDS-PAGE电泳结果表明其转化菌表达出47kDa左右的重组蛋白。