海水养殖环境下敌百虫对映体选择性降解研究

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敌百虫(trichlorfon,TF)是一种手性有机磷农药,在水产养殖中用于杀灭鱼体寄生虫,防治鱼虱虫病等,养殖中使用敌百虫易污染海水,在养殖塘底泥及养殖水产品中残留敌百虫,研究敌百虫对映体在海水养殖环境下的降解行为,可为养殖水产品安全风险评估提供依据。本文主要研究了海水、养殖塘底泥、养殖水产品中敌百虫对映体的降解行为。主要内容包括:1.建立了固相萃取(SPE)净化样品中敌百虫对映体的前处理方法,优化了提取溶剂、提取体积、上样p H等参数。净化海水样品方法为采用HLB固相萃取柱除去样品杂质;底泥样品采用CARB/NH2柱净化样品;水产品样品采用PLS柱进行固相萃取。建立了分析养殖海水、底泥样品以及水产品中敌百虫对映体的手性高效液相色谱法。检测海水样品的流动相比例及流速分别为正己烷:异丙醇:乙醇=90:8.5:1.5(v/v/v),流速1.0ml/min,R-(–)-TF方法检出限及定量限分别为0.012mg/L、0.040 mg/L,S-(+)-TF方法检出限及定量限分别为0.015 mg/L、0.050mg/L,日内精密度在2.94%~7.10%之间,日间精密度在5.22%~10.81%之间;检测底泥样品的流动相比例为正己烷:异丙醇=90:10(v/v),R-(–)-TF方法检出限及定量限分别为0.031μg/g、0.090μg/g,S-(+)-TF方法检出限及定量限分别为0.040μg/g、0.097μg/g,DDVP方法检出限及定量限分别为0.013μg/g、0.039μg/g,TF回收率在87.15%~91.76%之间,日内精密度在4.13%~8.97%之间,日间精密度在4.36%~9.10%之间,敌敌畏回收率在87.03%~91.85之间,日内精密度在1.22%~3.17%之间,日间精密度在2.11%~3.87%之间;采用内标法检测水产品样品中敌百虫对映体,以速灭威内标,分离敌百虫对映体及内标速灭威的流动相比例为正己烷:异丙醇=91:9(v/v),流速0.8ml/min,R-(–)-TF方法检出限及定量限分别为0.016μg/g、0.041μg/g,S-(+)-TF方法检出限及定量限分别为0.018μg/g、0.047μg/g,DDVP方法检出限及定量限分别为0.009μg/g、0.027μg/g敌百虫对映体的回收率在89.70%~99.96%之间,敌敌畏回收率在90.87%~97.85%之间,内标平均回收率为95%;敌百虫对映体日内精密度在3.83%~7.58%之间,日间精密度在4.30%~9.91%之间,敌敌畏日内精密度在1.98%~2.41%之间,日间精密度在2.10%~3.69%之间。2.考察了海水样品中敌百虫对映体在高浓度(10mg/L)、低浓度(0.5mg/L)及20 oC条件下,分别研究了自然、无菌、无光及无菌无光条件下的敌百虫对映体的降解行为,比较了不同条件下了敌百虫的降解速率k及降解半衰期t1/2,研究发现在不同温度及不同初始浓度的实验条件下ES自然>ES无光>ES无菌≈ES无菌无光,结果表明微生物是R-(–)-TF、S-(+)-TF产生立体选择性的主要因素,光照为养殖海水中的小型藻类提供光源,促使藻类利用敌百虫作为碳源及磷源合成自身所需物质,对敌百虫的立体选择性降解起到一定作用。研究了底泥中微生物对敌百虫对映体降解的影响,实验结果表明ES未灭菌>ES灭菌,微生物是造成敌百虫对映体立体选择性降解的主要因素,并且k未灭菌>k灭菌,t1/2未灭菌>t1/2灭菌,微生物同时影响了敌百虫的降解速率,使敌百虫降解周期减小。分别研究了-18 oC、4 oC、18 oC以及25oC下,敌百虫污染的水产品储藏过程中TF对映体的降解及转化行为,考察了储藏水产品中微生物总量对TF对映体降解速率及选择性降解的影响,结果表明敌百虫易降解形成毒性更高的降解产物敌敌畏(DDVP),随着储藏温度的提高,水产品中微生物总量越高,敌百虫对映体的降解越快,在18oC、25oC储藏条件下敌百虫对映体降解具有立体选择性,-18 oC、4 oC储藏条件下敌百虫对映体降解没有选择性。
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