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本论文对胰蛋白酶的固定化条件，固定化胰蛋白酶的性质，固定化胰蛋白酶水解酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽(CPP)的条件，以及CPP的沉淀分离条件进行了研究，对CPP的促进钙吸收的性质，CPP的分子量进行测定。 通过实验确定了以阴离子交换树脂D380为载体的交联法固定化胰蛋白酶，其最佳固定化条件为：交联剂(戊二醛)浓度为0.3％，交联温度20℃，交联时间10小时，加入酶液的pH值为8.0，酶液用量2ml(lmg／ml)，固定化时间1小时，固定化温度4℃。在此条件下，活力回收率可达到18.86％。 固定化胰蛋白酶的最适温度为55℃，比溶液酶提高了5℃；最适pH为8.0，与溶液酶相比无变化。热稳定性较溶液酶有一定程度的提高。在制备CPP的最佳水解条件下使用固定化胰蛋白酶，使用10次后，其活力为初始活力的85.1％，固定化酶的使用稳定性较好，可以推断使用以D380为载体的固定化胰蛋白酶可以降低CPP的生产成本。 以氮磷比(N／P)和得率为评价指标，通过单因素实验和正交实验，确定了固定化胰蛋白酶制备CPP的条件为：酪蛋白浓度4％，酶／底物([E]／[S])为900u／g，水解温度40℃，水解时间60分钟。CPP的沉淀分离条件为：沉淀pH为6.5，沉淀时间2-4小时。 对CPP促进钙吸收的性质进行测定，结果表明，0.2g／L和0.5g／L的CPP能完全阻止磷酸钙沉淀的生成，0.1g／L的CPP能使磷酸钙的生成推迟20分钟；使用SDS-PAGE法对CPP的分子量进行测定，可以分离出分子量为4600和3300的两种多肽。