血小板输注效果相关的HLA结构表位(eplet)初步研究及拉萨藏族献血人群HPA-1-6、15基因多态性分析

来源 :北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinyilin183
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目的本研究运用HLAMatchmaker对有血小板输注史患者的HLA基因型、预存HLA抗体及其血小板供者HLA基因型进行分析。初步探讨多次输注血小板后,患者体内HLA抗体的分布特点;血小板输注效果与患者预存抗体,以及供患者HLA结构表位(eplet)匹配程度的关系,为提高血小板输注效果提供基础数据。方法本研究的对象是具有血小板输注史的42名儿童血液病患者以及7名成人患者。依据血小板校正增高指数24h CCI<10判断血小板输注无效。应用PCR-SB T技术对患者及供者进行HLA-A、 B位点高分辨分型。使用单一抗原磁珠的方法对患者血清进行HLA抗体特异性确认。将HLA分型结果与抗体特异性结果导入HLAMatchmaker软件,分析患者体内预存抗体在eplet水平的特异性,供患者在eplet水平的匹配程度。结果本研究中42名儿童血小板输注中有11例为输注无效;7名成人患者血小板输注均无效。经HLA单一抗原特异性确认,49名患者的血清标本中有31份为HLA-Ⅰ类抗体阳性,抗体阳性率63.27%。其中,42名儿童血液病患者中,有24例为HLA-Ⅰ类抗体阳性(57.14%);结论本研究中具有血小板输注史患者体内HLA-Ⅰ类抗体分布具有一定的特征:从抗体所针对的等位基因水平分析,HLA-A、B类抗体检出最多的分别为A*68:02特异性抗体、B*15:12特异性抗体;从抗体所识别的eplet特异性分析,较常见的是12SMR、163LG、245VA、267PE、35Q。综合分析具有血小板输注史的患者体内预存抗体在eplet水平的特异性及供患者间eplet水平的匹配程度,初步推测12SMR、163LG、9H和71NT可能具有重要的临床意义,但尚需扩大样本量进行确认。目的研究血小板特异性抗原HPA-1—6、15在拉萨藏族献血人群中的分布特征。方法采用聚合酶链式反应-序列特异性引物(Polymeraseain reaction-sequence specific primer,PCR-S沈)技术对405名无亲缘关系的藏族无偿献血者进行HPA-1—6、15基因分型。方法可靠性第14届国际血小板免疫学讨会参比DNA验证,并选择部分标本W PCR-SBT复核。结果经参比DNA验证及PCR-SBT方法复核,本研究方法获得结果与原始结果均一致。405名无亲缘关系的藏族无偿献血者HPA各等位基因的频率分别为:-Ja:9383,:0.06170.9716,:0.0284;好货-:0.6173,占:0J827;如:0.9926,分必:0.0074:如;0.9494,地:0.0506;HPA-6a.9914,HPA-6b:0.0086;。其中,A-2、HPA-4、HPA-6均未检出b/b纯合子。各HPA抗原系统均符合Hardy-Weinberg遗传定律。与中国北方汉族人(n=904)相比,HPA-1、HPA-2、HPA-5、阻A-15系统基因频率差异具有统计学意义;与中国南方族人群如=1554)相比,HPA-1、HPA-2、HPA-3、HPA-4、HPA-5、HPA-15系统基因频率差异具有统计学意义;与新疆柯尔克孜族人群如=10相比,仅HPA-2系统基因频率差异具有统计学意义;与韩国人群(n=200)相比,HPA-1、HPA-2、HPA-3、HPA-5系统基因频率差异具有统计学意义(无HPA-15资料);与非洲刚果人群(n=125)相比,HPA-2、HPA-5、HPA-15系统基因频率差异具有统计学意义;与德国高加索人群(n=n9)相比,HPA-1、HPA-2、HPA-15系统基因频率具有统计学意义。结论拉萨藏族献血人群HPA-化基因频率低于高加索人群,与新疆柯尔克孜族人群频率接近,显著高于亚洲其他黄种人群;提示在拉萨藏族献血人群中由于HPA-1系统不相合引起免疫性血小板减少的几率可能远高于汉族人群。与其它民族和国家的同类资料相比,拉萨藏族献血人群的HPA各位点基因频率显示出明显的种族和地域性特征。
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