虫胶涂层制备及其生物相容性研究

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心血管疾病具有较高的致病率及死亡率,严重危害人体健康。常见的心血管疾病如冠心病、肺栓塞等的治疗手段为植入血管支架或下腔静脉滤器。二者在植入过程中均会与血管的内皮细胞接触,造成炎症细胞的激活及凝血级联反应的发生,导致血栓形成或血管内膜厚度增加。因此具有相同的要求,即抗凝抗增生。目前,常用的表面改性方法即在器械表面制备载抗增生药物的涂层,以实现抑制平滑肌增生的作用。但其在临床应用中仍旧存在较高的晚期血栓发生率,究其原因,在于部分涂层会导致血管壁发生过敏反应及无菌性炎症,生物相容性仍然存在不足。理想的心血管器械涂层应具有良好的生物相容性及血液相容性,在实现抗凝抗增生的同时还能够根据需求对内皮细胞的活性进行调控。研究发现,虫胶作为一种天然聚合物,具有良好的生物相容性,无毒可降解,作为涂层材料在医疗器械表面具有良好的应用前景。此外,研究表明,人体中存在的微量元素铜及血管舒张因子一氧化氮(NO)具有抗凝血、抗增生及促进血管重建等重要作用,且铜能够通过催化NO供体促进人体内NO的释放。因此本研究中,选择具有良好生物相容性的虫胶,对其进行碱处理后,在Ti Cu薄膜表面制备装载NO供体SNAP的虫胶涂层,研究涂层的表面成分、稳定性及NO释放速率,并研究涂层抗凝血、抗菌行为、及内皮细胞和平滑肌细胞的行为,希望在实现抗凝抗增生的同时,能够通过调控内皮细胞活性与增殖行为实现涂层在血管支架或下腔静脉滤器表面改性中的应用。XPS结果显示,SNAP与虫胶之间为物理混和,未产生明显的化学反应。稳定性实验结果表明,载SNAP的虫胶涂层在浸泡一个月内,涂层稳定,并未发生大面积剥落现象。NO释放速率检测结果显示,载SNAP的虫胶涂层在短期(60 min)内能实现持续且稳定的NO释放。涂层在一个月内能够实现持续催化NO释放。碱处理虫胶涂层、载SNAP的虫胶涂层的内皮细胞和平滑肌细胞的活性和增殖行为、血小板粘附行为、溶血率、抗菌行为等实验结果显示:碱处理虫胶涂层及载SNAP的虫胶涂层均能够明显抑制平滑肌细胞活性和增殖行为,并都能一定程度抑制内皮细胞的活性。虫胶涂层的浸提产物抑制了平滑肌和内皮细胞活性,但通过降低虫胶浸提产物的浓度能够一定程度上降低其对内皮细胞活性的影响,且保持对平滑肌的抑制作用。血小板粘附及溶血率结果显示,虫胶涂层和载SNAP的虫胶涂层可以明显抑制血小板的粘附与激活。其中载SNAP的虫胶涂层抑制血小板粘附效果最显著,所有样品溶血率均小于5%。抗菌实验结果显示,Ti Cu薄膜、虫胶涂层、载SNAP的虫胶涂层均具有明显的抗菌效果。其中载SNAP的虫胶涂层抗菌效果最显著,这是由于虫胶及Ti Cu薄膜、NO均表现出一定的抗菌性,因此认为三者发生了协同抗菌的作用。综上,虫胶涂层和载SNAP的虫胶涂层能够明显抑制平滑肌细胞的活性和增殖行为,在一定程度上抑制内皮细胞的活性和增殖,并能够抑制血小板粘附与激活,不溶血,拥有优异的抗菌性能。虫胶涂层和载SNAP的虫胶涂层有望借鉴并应用在与血液接触的器械如静脉血栓滤器等表面改性领域。
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