1.研究背景:　　 骨关节炎(Osteoarthritis,OA),是最常见的一种慢性、进展性关节疾病。其病理特点为关节软骨变性、破坏、软骨下骨硬化,关节边缘和软骨下骨反应性增生、骨赘形成。该病好发在负重较大的膝关节、髋关节、脊柱及手指关节等部位。临床上以关节疼痛、肿胀畸形、僵硬、功能障碍为主要表现。OA发病率随年龄的增长而增加,特别是当今世界进入老龄化,该病的发生率呈逐年上升趋势。　　 由于OA的病因和发病机制是一个非常复杂的过程,到目前为止尚未完全阐明。因此如何对OA进行早期诊断和治疗成为医学界的一大难题。现代医学研究认为关节软骨的损伤是OA的始动因素和中心环节,也是治疗的关键。而关节软骨的损伤则是以软骨中的蛋白多糖的降解和流失为首发事件。OA早期的病理学特征是软骨细胞周围的基质缺损,这是细胞周围的蛋白水解酶和胶原水解酶作用的结果。随着病情的进展会出现更多的软骨基质缺损,同时出现软骨纤维化、软骨面出现裂隙和软骨面的缺损。OA早期关节软骨中的蛋白多糖在机械应力、各种酶类的降解及一系列细胞因子等的共同作用下发生改变。蛋白多糖的变化包扩两个方面,一方面是它在关节软骨中的含量减少,另一方面是它的组成和分布也发生明显的变化。因此,对OA的特异性治疗应是针对于关节软骨的病理改变,修复软骨基质的缺损和恢复软骨细胞的功能。目前治疗OA的常用药物有非甾体抗炎药(NSADs)、改善症状的慢作用药(SYSADOA)和关节腔注射剂三大类。　　 OA属中医“痹症”范畴。中医学认为,机体关节的活动,筋脉的舒通,都以脾气健运,肝肾盛实,气血充盈,经络畅达为基础。因为肾主骨生髓,肝藏血柔筋活络,脾主肌肉与四肢。所以肢体关节、筋脉、腰膝之病皆与脾、肝、肾密切相关。如果肝肾不足,气血虚弱,则会使风寒湿邪乘虚而入,形成风寒湿痹证。《黄帝内经·痹论篇》日:“风寒湿三气杂至,合而为痹也,…。”痹者,闭也,就是闭阻不通之意。人体肝肾精血不足,筋脉失养,寒湿之邪侵入人体,流注关节,使气血痹阻。因此,其基本病机为肝肾亏虚、气血不足为本,风寒湿热、痰瘀互结为标,中药多以补益肝肾、益气养血、祛风散寒除湿、化痰逐瘀通络为主。　　 独活寄生汤为唐代医家孙思邈创制,载于其著《备急千金要方》一书中,是治疗风寒湿痹证的重要方剂之一。本方具有祛风散寒、蠲痹止痛、补益气血、滋养肝肾、舒通筋络的功效。方中以熟地、牛膝、杜仲、寄生补肝益肾,壮骨强筋。当归、芍药川芎和营养血,所谓治风先治血,血行风自灭。人参、茯苓、甘草益气扶脾,又所谓祛邪先补正,正旺则邪自除也。独活、细辛入肾经,能搜伏风,使之外出,桂心能入肝肾血分而祛寒,秦、防风为风药卒徒,周行肌表,且又风能胜湿。现代研究表明该方具有明显的抗炎、镇痛、消肿作用,并且具有调节机体免疫平衡,抑制非特异性炎症的作用。本实验采用不同的方法对其早期干预的效果进行检测,从不同角度验证中药在预防和治疗OA方面的作用。　　 2.研究目的　　 本实验通过采用豚鼠自发性OA的模型,动态观察不同时间点各组豚鼠早期OA胫骨平台软骨的形态学变化及血中蛋白多糖含量的变化,探讨独活寄生汤对豚鼠早期OA的干预作用。　　 3.研究方法　　 选用雌性1月龄Hartley豚鼠104只,随机分为正常组、模型组、中药组(独活寄生汤)、西药组(盐酸氨基葡萄糖)4组。其中正常组8只,其余3组每组32只,分1.5月、2月、2.5月、3月4个时间亚组,每组8只。各组动物分别于达到分组月龄后处死取胫骨平台软骨进行HE及阿利辛蓝染色,观察软骨的形态学变化、检测各组标本血清中蛋白多糖含量的变化、并采用显微红外检测软骨中蛋白多糖的结构及含量的变化。　　 4.结果　　 HE染色结果显示模型组2月龄时开始出现软骨的轻度损伤,阿利辛蓝染色结果显示2月龄时软骨中蛋白多糖的含量开始下降,到3月龄时豚鼠的胫骨关节面软骨均有不同程度的破坏、软骨中的蛋白多糖含量下降。中药组和西药组软骨破坏程度较轻,尤以中药组改变轻微。血清蛋白多糖Elisa检测结果显示模型组血清蛋白多糖含量自1.5月开始下降,而且随年龄的增长而逐渐降低,且不同月龄组间差异显著。中药组和西药组血清蛋白多糖下降程较模型组轻,尤以中药组血清蛋白多糖含量下降程度最轻。显微红外检测结果显示,模型组自1.5月龄时豚鼠的胫骨关节面软骨蛋白多糖结构和含量就已有改变,到3月时与其它两治疗组比较改变明显,但中药组和西药组较模型组改变轻微,尤以中药组改变最轻。　　 5.结论　　 OA早期关节软骨的破坏过程中,蛋白多糖的降解是重要的因为,经不同方法检测显示中药独活寄生汤可以抑制关节软骨中蛋白多糖的降解从而防止或延缓了关节软骨的退变。血清Elisa检测与显微红外检测方法为oA的早期检测提供了新的思路和方法学参考。