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研究背景:五味子是一种历史悠久的中草药,广泛用于各类疾病的治疗,五味子乙素(Sch B)是从中分离出的主要活性成分之一,既往发现对肝脏、心血管、中枢神经等具有保护作用。近年来发现Sch B有促进成骨细胞增殖分化和减少体内脂肪形成的作用,本研究拟通过动物模型和体内外实验验证Sch B对小鼠骨质疏松症的防治作用,并初步证实其通过Wnt/β-catenin信号通路调控BMSCs分化的作用机制,为Sch B临床应用及骨质疏松症新药物研发提供实验依据。目的:1.观察Sch B对老年小鼠骨质疏松的影响;2.观察Sch B对去卵巢小鼠骨质疏松的影响;3.研究Sch B对BMSCs成骨和成脂肪分化作用的影响;4.探索Sch B对BMSCs成骨和成脂肪分化作用的调控机制。方法:第一部分:选取雄性老年小鼠分为实验组及对照组,分别行Sch B溶液和生理盐水灌胃,3个月后microCT扫描双下肢骨密度后行骨组织切片HE、TRAP、IHC染色,比较成骨指标、骨内脂肪及破骨细胞数目。第二部分:随机选取雌性小鼠行去卵巢手术后,实验组灌胃Sch B溶液,假手术组和对照组灌胃等量生理盐水,3个月后microCT扫描双下肢骨密度,骨组织切片比较成骨指标、骨内脂肪及破骨细胞数目。第三部分提取小鼠骨髓间充质干细胞进行成骨/成脂肪分化诱导并加入Sch B溶液处理。对各组细胞染色观察分化结果,Western Bloting检测分化过程的相关指标表达量。第四部分:1.用Sch B处理过的普通培养基培养BMSCs,激光扫描共焦显微镜、Western Bloting法检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达差异。2.在第三部分所使用的培养基中加入ICG-001后观察各组分化指标差异。结果:1.与对照组相比,实验组小鼠股骨骨密度较高,且均有显著性差异(P<0.05);实验组小鼠骨髓内出现脂肪聚集明显减少,且具有显著性差异(P<0.05);2.三组小鼠骨密度对比,假手术组>实验组>对照组(P<0.05);实验组骨髓内出现脂肪聚集明显减少,与对照组具有显著性差异(P<0.05);3.接受Sch B处理的BMSCs成骨矿化增强,成脂肪分化受抑制,脂肪细胞形成减少;4.接受Sch B处理的BMSCs胞内β-catenin蛋白增多,诱导培养时使用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂可以消除Sch B对BMSCs成骨和成脂肪分化的影响。结论:Sch B通过激活Wnt/β-catenin信号通路增强BMSCs成骨分化、抑制成脂肪分化,增加骨形成和减少骨内脂肪形成,对于原发性Ⅰ、Ⅱ型骨质疏松症有治疗作用。