VEGF基因在妊娠期绵羊主要生殖器官表达的研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:xiaoxiaolong1314
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
VEGF基因能特异性地促进内皮细胞的增殖和血管新生。在雌性动物的的卵泡发育、卵母细胞的成熟、黄体的形成与功能的维持、早期胚胎植入、子宫蜕膜化及胎盘的形成等生理过程中,VEGF都起着十分重要的作用。因此进一步了解成年绵羊母羊在妊娠不同时期生殖器官,包括卵巢上的卵泡、输卵管及子宫内膜上VEGF基因的表达变化规律以及在高繁殖力的小尾寒羊和低繁殖力的东北细毛羊子宫内膜中VEGF基因的表达差异。探讨VEGF在绵羊母羊妊娠发育过程中的作用。初步阐明VEGF基因对绵羊妊娠发育的影响与调控机制。不仅可为反刍动物高效繁育调控与提高动物繁殖潜力提供理论指导,同时也可为开发新的调控繁殖性能的疫苗或药物奠定基础。本研究采用了反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,分别从不同孕期的东北细毛羊和小尾寒羊的卵巢上的卵泡、输卵管和子宫内膜中提取总RNA扩增VEGF基因,通过T4DNA连接酶将其直接连接于克隆质粒载体pMD-19-T中,转化至受体菌JM109中,通过质粒提取、PCR鉴定、序列测定,证明重组质粒pMD-19-T-VEGF中含有VEGF基因,并以β-Actin作为内源性内标检测了VEGF的mRNA在孕期绵羊卵巢上的卵泡、输卵管和子宫内膜中的表达情况,并对VEGF的部分cDNA片段进行序列测定。以期阐明VEGF基因在不同繁殖力的不同妊娠时期绵羊主要生殖器官中的作用,研究结果表明:绵羊妊娠前期、中期、后期子宫内膜中VEGFmRNA均有强烈表达,随着妊娠的持续,子宫内膜的表达逐渐升高,且妊娠早期、中期、晚期相比子宫内膜中VEGFmRNA表达差异显著(P<0.05)。而在输卵管和卵巢上的卵泡的变化不明显。绵羊在妊娠时期子宫内膜上VEGF基因的表达水平明显高于妊娠时卵巢上的卵泡和输卵管的表达水平(P<0.05),而输卵管的表达水平又明显高于卵巢上的卵泡的表达水平(P<0.05)。同时,VEGFmRNA在东北细毛羊与小尾寒羊妊娠同一时期的子宫内膜、卵巢上的卵泡、输卵管相比差异不显著。测序结果显示实验羊的部分核苷酸序列与人(81bp)的同源性为96.30%,人340位的碱基为G,而绵羊相对于该位点的碱基突变为A,人363位的碱基为C,而绵羊相对于该位点的碱基突变为T,人370位的碱基为C,而绵羊相对于该位点的碱基突变为T。
其他文献
本研究通过体外产气法、瘘管技术、尼龙袋法和全收粪尿消化代谢试验法研究了日粮纤维水平和精粗比对绒山羊瘤胃代谢及纤维降解率的影响。 试验一,选用玉米秸秆、苜蓿干草、
目的:早期断奶应激是仔猪营养学急需解决的重要命题之一。前期研究发现断奶后仔猪体内活性氧(ROS)失衡是导致断奶应激产生的重要原因,解偶联蛋白2(UCP2)具有调控ROS产生和能量代谢
肉牛舍的温热环境及空气卫生环境状况对肉牛的健康和增重及对饲料的采食量和利用效率有重要影响。不同的饲养工艺会对舍内的温热环境、空气卫生环境和肉牛的行为产生影响,合
本论文研究内容是水牛垂体催乳素cDNA的克隆与原核表达。论文第一部分包括第一章,为文献综述部分;第二部分包括第二章和第三章,为试验部分。水牛是我国南方重要的经济动物物种,有