【目的】:
　　1.观察DiaporisoindoleB（DPB）是否通过抑制炎症介质PGE2,TNF-α,IL-1β和IL-6的表达来发挥抗炎作用。
　　2.观察DPB发挥抗炎作用的机制是否与NF-κB和MAPKs信号转导通路有关。
　　【方法】:
　　1.用1μg/mL的脂多糖（LPS）刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞，使其发生炎症反应，24小时后检测细胞上清液中NO的表达量，构建细胞炎症模型。
　　2.MTT检测不同浓度DPB（3.125μM,6.25μM,12.5μM,25μM）对RAW264.7小鼠巨噬细胞的细胞毒性作用。
　　3.实验分为正常组、模型组与给药组，给药组给予不同浓度的DPB（3.125μM,6.25μM,12.5μM,25μM）预处理细胞1h，随后与终浓度为1μg/mL的脂多糖共同作用细胞，24小时后收集细胞上清液，GriessReagent测定NO的含量，ELISA检测PGE2,TNF-α,IL-1β和IL-6的表达水平。
　　4.给药组给予不同浓度的DPB（3.125μM,6.25μM,12.5μM,25μM）预处理细胞1h，随后与脂多糖共同作用12h，提取总RNA，反转为cDNA，RT-PCR检测iNOS,COX-2及炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6的基因表达量。
　　5.给药组给予不同浓度的DPB（3.125μM,6.25μM,12.5μM,25μM）预处理细胞1h，随后与终浓度为1μg/mL的脂多糖共同作用24h，提取蛋白，Westernblot检测不同浓度DPB对iNOS,COX-2蛋白水平的影响，并观察不同浓度DPB对NF-κB信号转导通路中的IκB-α磷酸化蛋白（p-IκB-α）,IκB-α总蛋白（IκB-α）,NF-κBp65磷酸化蛋白（p-NF-κBp65）,NF-κBp65总蛋白（NF-κBp65）表达的影响，及对MAPKs信号转导通路中的ERK1/2磷酸化蛋白（p-ERK1/2）,ERK总蛋白（ERK1/2）,JNK磷酸化蛋白（p-JNK）,JNK总蛋白（JNK）,p38磷酸化蛋白（p-p38）和p38总蛋白（p38）表达的影响；同样的方法，Westernblot 进一步检测不同浓度DPB对通路上游MyD88蛋白表达的影响。
　　【结果】:
　　1.模型组经浓度为1μg/mL的脂多糖24h刺激后，细胞上清液中检测出31.37μM的NO，与正常组（0.15μM）相比，差异具有统计学意义（P<0.001），细胞炎症模型成功建立。
　　2.浓度为3.125μM,6.25μM,12.5μM,25μM的DPB对RAW264.7小鼠巨噬细胞均未表现出毒性反应，与对照组相比，细胞相对活力均大于95%。
　　3.与模型组相比，不同浓度的DPB都能不同程度的降低脂多糖诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞中的炎症介质NO,PGE2,TNF-α,IL-1β和IL-6的表达量，差异具有统计性意义（P<0.05）。
　　4.与模型组相比，DPB能不同程度的降低脂多糖诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞中的iNOS,COX-2,TNF-α,IL-1β和IL-6的基因表达量，差异具有统计性意义（P<0.05）。
　　5.与模型组相比，DPB能显著性降低脂多糖诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞中iNOS和COX-2的蛋白表达（P<0.05）。对DPB抗炎分子作用机制进行的研究结果显示，DPB能够显著性地降低NF-κB信号通路中IκB-α、NF-κBp65的蛋白磷酸化水平（P<0.05），但对IκB-α、NF-κBp65总蛋白水平没有规律性影响，同样，DPB能够显著性地降低MAPKs信号通路中ERK1/2、JNK、p38的蛋白磷酸化水平（P<0.05），对ERK1/2、JNK、p38总蛋白水平也没有规律性影响。此外，DPB能够降低上游MyD88蛋白表达（P<0.05）。
　　【结论】:
　　1.DPB可显著性抑制脂多糖引起的RAW264.7小鼠巨噬细胞中炎症介质NO,PGE2,TNF-α,IL-1β和IL-6的表达。
　　2.DPB可显著性抑制RAW264.7小鼠巨噬细胞中iNOS、COX-2的基因及蛋白表达，并能显著性抑制炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6的基因表达。
　　3.DPB发挥抗炎作用的机制可能与抑制NF-κB及MAPKs信号通路的激活有关。
　　4.DPB可能通过下调上游的MyD88蛋白实现对NF-κB及MAPKs信号通路的调控。