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目的:本研究探究miR-128-3p是否参与了胃癌(Gastric Cancer,GC)细胞释放免疫相关细胞因子的过程或影响胃癌肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)中的免疫细胞的浸润,从而促进肿瘤免疫逃逸。方法:生物信息学分析预测miR-128-3p调控的下游靶基因。基因组富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)分析不同免疫细胞与IL-16和miR-128-3p表达之间的相关性。收集7对新鲜胃癌组织样本及7例胃癌患者外周血液,使用实时荧光定量PCR(quantitative real-time reverse,qRT-PCR)及蛋白印迹(western blot,WB)分析新鲜胃癌组织中miR-128-3p mRNA表达及IL-16蛋白表达水平。荧光素酶测定miR-128-3p调节IL-16的机制。使用ELISA检测已处理的胃癌细胞上清液中IL-16的浓度。从胃癌患者的外周血中分离淋巴细胞,并与已处理的胃癌细胞共培养,通过流式细胞学评估Treg亚群的比例。结果:在本研究中,我们利用肿瘤基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库对miR-128-3p高表达及miR-128-3p低表达的胃癌进行了对比,并对相关细胞因子进行了差异表达分析,发现IL-16、SEMA4C以及STC1等细胞因子表达与miR-128-3p低表达相关,且可能是miR-128-3p的直接靶基因。通过新鲜组织验证发现miR-128-3p低表达的胃癌组织中IL-16的表达显著升高。并且在IL-16的3’UTR区我们发现了miR-128-3p的2个结合位点,荧光素酶报告基因实验发现miR-128-3p可直接负调控IL-16的表达。利用GSEA分析不同免疫细胞与IL-16和miR-128-3p表达之间的相关性时,发现在不同的免疫细胞中,Treg细胞富集评分与IL-16的表达最显著正相关,与miR-128-3p的表达呈负相关。而在细胞水平,升高IL-16分泌水平或重组蛋白IL-16可显著刺激体外培养淋巴细胞中的CD4~+CD25~+FOXP3~+Tregs的比例。结论:miR-128-3p/IL-16轴的异常活化可影响胃癌肿瘤微环境CD4~+CD25~+FOXP3~+Tregs分化,进而促进胃癌免疫逃逸。这些结果表明,阻断miR-128-3p、IL-16以及Tregs之间相互作用的靶向策略可能具有抵抗胃癌免疫逃逸的潜力。