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柯萨奇病毒(Coxsackievirus，CV)和脊髓灰质炎病毒(poliovirus，PV)均属于小RNA病毒科肠道病毒属，主要通过粪-口途径传播。本研究选取柯萨奇病毒VP1区和脊髓灰质炎病毒基因组2A区分别设计引物和探针，经特异性测试表明建立的检测体系均高度特异于对应血清型病毒检测。本研究基于构建的质粒标准分子分析检测体系灵敏度，结果表明柯萨奇病毒和脊髓灰质炎病毒的普通RT-PCR检测下限均为50拷贝质粒标准分子DNA，实时荧光RT-PCR检测下限均为2拷贝质粒标准分子DNA。针对以上体系制作的标准曲线具有很好线性关系(R2＞0.999)和较高反应效率。初步建立了高特异性和灵敏度的柯萨奇病毒和脊髓灰质炎病毒RT-PCR检测体系。
在此基础上，本研究进一步通过对于人工接种病毒食品样品的检测研究，建立了适用于食品中柯萨奇病毒、脊髓灰质炎病毒的富集、RNA提取、纯化、普通RT-PCR和实时荧光RT-PCR检测方法。