目的 建立机械牵拉培养细胞模型；探讨人皮肤成纤维细胞在体外应力牵拉作用下增殖特性的改变；研究单次较大幅度的机械应力（40％的延长度）作用下细胞增殖核抗原表达与细胞外基质分泌的情况；探讨TGFβ₁、bFGF在应力作用下的表达状况。通过实验，模拟临床常用的皮肤软组织扩张术应力刺激细胞增殖的效应，利用体外细胞培养模型，在分子水平研究应力作用于皮肤成纤维细胞并促进细胞增殖的机理，同时验证自行研制的机械应力刺激细胞培养模型的可行性，为以后更深一步研究皮肤扩张术应力刺激细胞增殖的机理建立一种新的实验研究方法。方法 实验第一部分为机械牵拉细胞培养模型的设计与制作，根据国外报道常用的机械牵拉细胞培养模型的原理，结合皮肤扩张术和牵张术的临床应用特点，自行设计并制作出机械牵拉细胞培养模型；取植皮术中剩余的全厚皮，常规原代培养皮肤成纤维细胞，取3-5代的成纤维细胞种植于模型的弹性膜上继续培养。采用牵拉变形40％为本实验用的延长度。实验第二部分分为对照组（未牵拉组）与实验组（不同时间点的牵拉组），分别于牵拉前、12h、24h、36h、48h、60h、72h时间点后，计数每个时间点的细胞数，绘制生长曲线；利用MTT法检测细胞的增殖情况；利用流式细胞仪测定牵拉后细胞周期改变的特点；同时取牵拉48小时组与对照组细胞，经过细胞计数、蛋白定量后行WESTERN-BLOT检测细胞增殖核抗原（PCNA）的表达。实验第三部分采用MTT法测定条件培养液刺激皮肤成纤维细胞增殖的情况；WESTERN-BLOT方法检测牵拉后12h、24h、36h、48h、72h不同时间点TGFβ₁、bFGF的表达情况。实验第四部分取牵拉48小时组与对照组细胞，利用细胞甩片机制成细胞涂片，免疫组化染色，检查Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果：经过反复设计、调整、最终研制成功了牵拉细胞培养模型，该模型具有价格便宜、制作方便、操作简单、消毒可靠、培养过程中观察容易等优点。人皮肤成纤维细胞在模型中生长状态良 第。军医大学项士学住论文好，细胞形态与正常比较未见明显差异。通过对牵拉后不同时间点的细胞增殖数量的检测，证实牵拉后细胞的数量较对照组明显增加；利用流式细胞仪检测牵拉前后不同时间点细胞周期的变化，发现牵拉36小时后S期细胞比例达到最高：而蛋白电泳的方法亦证实牵拉后48小时P＊＊A的表达阳性而对照组阴性。利用牵拉48小时后模型中培养细胞的上清液作用常规培养的成纤维细胞的条件培养液，结果证实牵拉后的条件培养上清液能明显刺激细胞增殖；利用蛋白电泳的方法比较牵拉后不同的间点TGFpl、bFGF的表达，发现牵拉48小时后两者的表达较未牵拉时明显增加。利用免疫组化的方法检测发现牵拉后48h、Ill型胶原蛋白的表达增加。结论：人皮肤成纤维细胞在牵拉细胞培养模型中生长良好，单次较大幅度的机械应力刺激能改变细胞周期，刺激PCNA的表达，促进细胞增殖，使 TGF PI、bFGF的表达增加，同时导致 1、Ill型胶原蛋白的合成增加。