再生障碍性贫血中医证型与外周血端长度及TRF1,TRF2,POT1基因表达水平的相关性研究

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目的:测定再生障碍性贫血(Aplastic Anemia,AA)患者外周血单个核细胞的端粒长度,端粒保护蛋白TRF 1、TRF 2、POT 1的mRNA表达水平;同时探讨再障中医辨证分型与外周血单个核细胞端粒长度变化、端粒保护蛋白TRF 1,TRF 2,POT 1的表达水平之间的关系,并分析端粒、TRF 1、TRF 2、POT 1之间的相关性,进一步从分子水平探讨AA的发病本质,以期为研究其发生发展及治疗寻求新的思路。方法:首先将40例AA患者按照中医辨证分型标准进行辨证分组,肾阳虚组13例、肾阴虚组13例、肾阴阳两虚组14例。并选取20例正常人外周血单个核细胞作为对照组。运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)检测患者与正常对照组外周血单个核细胞的端粒长度、端粒保护蛋TRF1,TRF2,POT1mRNA表达水平。探讨AA患者中医辨证分型与外周血单个核细胞端粒长度变化、端粒保护蛋白TRF1,TRF2,POT1 mRNA表达水平的相关性;研究AA患者外周血单个核细胞端粒长度、TRF1,TRF2,POT1之间的相关性。结果:1.再障患者TRF1,TRF2,POT1 mRNA表达水平较正常对照组升高,均有显著性差异(TRF1,TRF2,POT1,P<0.05),有统计学意义;2.AA患者端粒长度变化情况较正常对照组降低,有统计学意义(P<0.05);3.肾阳虚型、肾阴虚型、肾阴阳两虚型AA患者TRF1 mRNA的表达水平均较正常对照组明显升高,均有显著性差异(肾阳虚、肾阴虚型、肾阴阳两虚型,P<0.01),有统计学意义;肾阳虚型、肾阴虚型AA患者TRF2 mRNA的表达水平均较正常对照组升高(肾阳虚型、肾阳虚型,P<0.05),有统计学意义;肾阳虚型AA患者POT1mRNA的表达水平均较正常对照组升高(肾阳虚型P=0.039,P<0.05),有统计学意义。4.肾阳虚型AA患者端粒长度变化情况均较正常对照组降低(肾阳虚型P=0.019,P<0.05),有统计学意义。5.中医各证型之间,肾阴虚型TRF2mRNA表达水平较肾阴阳两虚型升高(肾阴虚型P=0.034,P<0.05),有统计学意义。结论:1.TRF1,TRF2,POT1,端粒可能参与了再障的发病过程,且TRF1,TRF2,POT1高表达可能与端粒长度缩短有着密切的关系;2.端粒长度的缩短在再障的发病或疾病进展中起到重要作用,端粒长度在肾阳虚组表达最低,肾阳虚的再障患者端粒长度可能缩短更明显,端粒损耗最为严重,TRF1,TRF2,POT1很有可能与端粒缩短的过程,并可能与再障的预后有关;3.端粒长度与TRF1,TRF2表达之间呈负相关,POT1与TRF1表达之间呈正相关,提示TRF1,TRF2极有可能参与了端粒损伤缩短的过程,POT1可能通过影响TRF1而间接参与了这个过程,短端粒与再障的发病密切相关。
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