结直肠癌中Lumican基因表达及其与EMT的关系研究

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研究目的:本课题在前期蛋白质组学的研究基础上,对差异表达的Lumican做进一步的研究。本研究首先采用荧光定量PCR技术对Lumican在结直肠癌中的表达情况进行检测,初步探讨Lumican在结直肠癌中的表达情况及其与临床病理参数的关系,然后通过免疫组织化学技术,分析E-钙黏蛋白和波形蛋白在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达变化,最后分析结直肠癌中Lumican与EMT的相关性,为下一步研究Lumican的分子作用机制奠定基础,为今后探索肿瘤的分子诊断标记物和基因靶向治疗提供理论依据。方法:收集广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科2012年3月-9月70例结直肠癌组织及其相对应的癌旁组织,均经病理证实,且均未行术前放化疗,提取RNA,逆转录成cDNA,标记、超低温保存。设计合成Lumican目的基因及β-actin内参基因的引物,优化荧光定量PCR反应条件后,应用该技术测得相应的扩增CT值,通过2-△△ct法分析结果,确定Lumican在结直肠癌中的表达情况并分析其与临床病理参数的关系。通过免疫组织化学技术检测结直肠癌组织EMT发生的标记蛋白E-钙黏蛋白和波形蛋白表达,以明确结直肠癌发生发展过程中是否有EMT过程的发生,分析Lumican与EMT的关系。结果:通过2-△△ct法分析,Lumican在结直肠癌组织中的表达高于癌旁组织(p<0.05),但Lumican在结直肠癌中的表达与肿瘤患者的性别、年龄、肿瘤直径、TNM分期、术前血清CEA水平、淋巴结转移、浸润深度、肿瘤分化程度均无关(p>0.05)。免疫组化结果显示E-钙黏蛋白在癌组织中的表达下降,波形蛋白恰恰相反,差异具有统计学意义(p<0.05)。这说明结直肠肿瘤的发生与发展过程中有EMT的参与,相关分析结果表明Lumican在癌组织中的表达与EMT具有相关性。结论:1. Lumican在结直肠癌中的表达高于癌旁组织。2.结直肠癌组织中Lumican表达与肿瘤患者的性别、年龄、肿瘤的直径、TNM分期、血清CEA水平、淋巴结转移、浸润深度、分化程度、远处转移均无关。3.EMT可能是Lumican参与结直肠癌的发生发展的重要途径或机制之一。
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