沼泽小叶桦再生体系的建立和耐盐性分析

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本文系统地研究了沼泽小叶桦组织培养快速繁殖技术体系和盐胁迫对其生长和光合特征的影响。以嫩枝上的腋芽作为外植体,进行了丛生芽诱导、生根、移栽等方面的研究;探索了以茎段为外植体诱导愈伤组织的最佳激素组合,以及愈伤组织再分化的培养基组成,建立了高效稳定的再生体系。以半年生幼苗为实验材料,研究了不同浓度NaCl处理对其幼苗生长、光合特性、叶绿素荧光参数以及几种抗逆生理指标的影响,分析了沼泽小叶桦的耐盐性。主要研究结果如下:1.MS培养基为沼泽小叶桦高效再生的最佳基本培养基,以芽为外植体的最佳不定芽诱导分化培养基为MS+6-BA1.0mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,在该培养基上丛生芽分化率高达99%,增殖率可达12.5,新生芽生长状态良好。2.在沼泽小叶桦再生苗生根阶段,在以1/2MS培养基为基本培养基的前提下,对激素IBA与NAA进行对比试验,最终筛选出激素IBA 比 NAA更适合沼泽小叶桦的生根培养。最佳再生苗生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,在该培养基上再生苗的生根率达100%,平均根数为7~8条,平均根长为4.11cm,根较粗壮,基部无愈伤组织。生根苗移栽的最佳基质配比为草炭土:蛭石:珍珠岩=6:2:2,成活率达到99%以上。3.利用培养条件将脱分化与再分化过程分开,建立了一个高效的经愈伤组织途径的再生体系,愈伤组织诱导的最佳激素组合为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L以及弱光培养;诱导愈伤组织出芽的最佳激素组合MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.02mg/L+蔗糖 20g/L+琼脂 6g/L。4.通过对不同浓度NaCl处理下,不同时间的沼泽小叶桦光和参数和叶绿素荧光参数的测定,发现在盐胁迫下净光合速率(Pn)呈下降趋势,气孔导度(Cond)和蒸腾速率(Tr)的变化趋势与Pn相一致;1.7~2.2%NaCl处理中,随着处理时间的增加,Cond和Ci呈相同的变化趋势。当NaCl浓度低于1.5%时,叶绿素荧光参数的各项指标只有微小变化,当NaCl浓度高于1.5%时各指标有显著变化,表明沼泽小叶桦具有较强的耐盐性。5.在不同浓度的NaCl处理下,对沼泽小叶桦的生长进行观测,发现沼泽小叶桦幼苗的生长受到不同程度的影响,且随着盐浓度的升高,受抑制程度越明显。NaCl浓度低于1.5%时,幼苗叶片绿色,受盐影响较轻;NaCl浓度达到1.5%或更高时,幼苗出现叶片发黄、枯萎并脱落,植株生长状态变弱。6.在盐胁迫下,叶片中叶绿素含量随着处理浓度的增加和时间的延长变化不大,300mM NaCl处理下沼泽小叶桦幼苗叶片中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性表现出先升高后降低的趋势,400mM NaCl浓度下,SOD和POD的活性随胁迫时间的延长而明显上升,丙二醛(MDA)含量则表现出逐级递增趋势。
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