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目的: 揭示DNA甲基化,在宁夏回汉族人群中动脉粥样硬化(AS)发生发展过程中出现的异常改变,建立回汉族两民族之间,AS的特异性DNA甲基化谱,探索特异性DNA甲基化谱,在回汉人群中,对AS的早期风险评估及预测作用,为早期预防、诊断及治疗AS提供新思路及线索。 方法: 研究对象:宁夏回汉AS和正常健康人群,年龄30-65岁;收集标本时间:2013年1月至2014年2月;收集标本地点:宁夏医科大学总医院心内科和体检部。标本采集及检测:空腹采集足够的静脉血液,分离血浆和血细胞,生化分析仪检测血浆中的TG、TC、HDL和LDL,血细胞用于提取DNA和RNA,检测外周血细胞DNA甲基化及其mRNA表达;研究对象分组标准:临床指征和血脂水平作为辅助诊断,颈动脉多普勒超声确诊AS斑块存在的人群,分为AS组,跟据民族,分为回族AS组和汉族AS组;颈动脉多普勒超声确诊无内膜增厚和斑块形成的人群,作为正对常对照组,根据民族,分为回族正常对照组和汉族正常对照组;总共四组,每组的样本各50例,提取每组外周血样本的DNA和RNA进行下一步实验,将从样本中提取的DNA进行重亚硫酸盐修饰,用ntMS-PCR检测筛选的11个基因的启动子区甲基化水平,用实时荧光定量PCR检测建谱基因的mRNA相对表达水平,探讨这两民族AS的DNA甲基化是否存在差异以及和基因表达的关系,经过统计分析,筛选出特异性和敏感性较高的基因,作为研究目标,建立回汉族AS特异性DNA甲基化谱,评价DNA甲基化谱,在回汉族AS疾病,早期分子生物学标志物预测及诊断价值。 结果: 结果显示,LCAT、PPARα、TIMP-1、ICAM1和ABCA1这五个基因的甲基化程度,在回族AS组和回族对照组间,有着明显差异(P<0.05);PPARα、TIMP-1和ABCA1三个基因甲基化程度,在汉族AS组和汉族AS组对照组间,有差异(P<0.05);结果还显示,LCAT、PPARα、TIMP-1和ABCA1,在回族AS人群中,具有较好的诊断价值(P<0.05);在汉族AS人群中,只有TIMP-1具有诊断价值,如果将LCAT、PPARα、TIMP-1和ABCA1这四个基因联合检测AS,则预测回族AS的灵敏度和特异度达到86.1%和88.1%,联合诊断价值达到0.923,这一结果说明建立及应用DNA甲基化谱在预测早期回族AS的发生及发展有意义。 结论: 1.回族AS组和回族对照组相比较,LCAT、PPARα、TIMP-1、ICAM1和ABCA1五个基因甲基化改变有显着差异。 2.汉族AS组和汉族对照组相比较,PPARα、TIMP-1和ABCA1三个基因甲基化改变有显着差异。 3.LCAT、PPARα、TIMP-1和ABCA1四个基因甲基化改变,对诊断回族AS有较好的特异度和灵敏度。 4.在汉族AS人群中,TIMP-1对诊断AS,具有较高的特异度和灵敏度。