二硫化碳对雄性大鼠睾丸生殖细胞线粒体相关途径细胞凋亡的影响

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目的:探讨不同浓度CS2亚慢性染毒对大鼠睾丸生殖细胞线粒体途径细胞凋亡的影响。方法:清洁级健康SD雄性大鼠24只,随机分为4组,CS2染毒浓度分别为0、50、250、1250mg/m3,静式吸入染毒,每周5天,每天2小时,共10周。染毒结束后,断头处死动物,提取睾丸生殖细胞中胞浆蛋白,WB法检测AIF、Cyto C、Bcl-2、Bax、Procaspase-9/3含量;提取总蛋白,分光光度法检测Caspase-9/3酶活性;提取线粒体蛋白, ELISA法检测MPTP及线粒体中呼吸酶复合物I-V的表达水平;提取总RNA,应用qPCR法检测AIF、Cyto C、Bcl-2、Bax、Procaspase-9/3等各基因相对表达水平。结果:与对照组相比,各染毒组大鼠睾丸生殖细胞胞浆中Cyto C含量上升(P <0.05);在中浓度组中,Bax/Bcl-2比值、Caspase-9/3酶活性上升,Procaspase-9/3蛋白的表达水平下降(P <0.05);在高浓度CS2作用下, Bax和AIF蛋白的相对表达水平上升,而Bcl-2蛋白表达水平则下降(P <0.05)。与对照组相比,各染毒组大鼠睾丸生殖细胞中MPTP水平有明显的下降(P <0.05),线粒体内呼吸酶复合物I-V表达水平上升(P <0.05)。与对照组相比,各染毒组动物睾丸生殖细胞中Caspase-9及Bax mRNA表达水平上升(P <0.05),Bax与Bcl-2mRNA表达水平之比亦升高(P <0.05);在高浓度CS2作用下,睾丸生殖细胞中Cyto C、Caspase-3和AIF mRNA相对表达水平上升,而Bcl-2mRNA表达水平则有明显下降(P <0.05)。结论:CS2染毒可影响雄性大鼠睾丸生殖细胞线粒体途径的细胞凋亡过程。
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