恶性肿瘤的生长依赖于血管的形成，肿瘤血管不仅为肿瘤生长提供营养和排 泄代谢产物，而且也是肿瘤远处转移的直接通道。血管形成是指从预先存在的小 血管上形成新血管的过程。人类从本世纪70年代就开始对肿瘤的新生血管形成 进行系统的研究，己经证明恶性肿瘤的血管形成过程是受血管形成因子和抑制因 子严密调控的。目前己经发现了30多种具有促血管形成作用的细胞因子，bFGF （碱性成纤维细胞生长因子）、VEGF（血管内皮细胞生长因子）、TGF（转化生 长因子）等是研究较多的几种，其中bFGF是目前己知的作用最强的一种促血管 形成因子。已发现的抑制血管形成的物质也有30多种，干扰素是其中较重要的 一种。干扰素对一些肿瘤有确实的疗效，以往证明其抗肿瘤作用是通过直接抑制 癌细胞生长和调节机体抗肿瘤免疫实现的，近年来证明其有抗血管形成作用。人 参皂甙Rg3是从人参提取的单体成分，文献报道具有抑制肿瘤浸润和转移的作 用，但其确切机制尚未阐明。本课题实验从抗血管形成方面探讨它们抑制肿瘤生 长和转移的机制。 目的： l．探讨IFN-α和人参皂甙Rg3抗肿瘤血管形成的作用机理。 2．探讨两种制剂是否有抗血管形成的协同效应。 方法： l．用含不同浓度的IFN-α或Rg3的 MI 99（以不含受试药物的 M199为对照） 培养人脐静脉内皮细胞，用含不同浓度的 IFN-α或 Rg3的 1640（以不含 受试药物的1640为对照）培养人肺癌SPC－A－l细胞，MTT法测细胞存 活率的变化，判断对细胞增殖的影响。 2．用药物预处理肺癌细胞，取培养上清制备条件培养液孵育内皮细胞，根 据细胞存活率变化判断药物是否影响肿瘤细胞对内皮细胞的作用。 3．用未经药物预处理的肺癌细胞的培养上清制备成含不同浓度IFN－α或 Rg3的条件培养液后孵育内皮细胞，根据细胞存活率变化判断药物是否 对内皮细胞的增殖有影响。 4．在纤维蛋白胶中用含不同浓度 IFN-α或 Rg3的 M199进行肺癌细胞和内 1 Wf＃＆ffPZf＆t 4tM＃ 皮细胞的复合培养，检测对癌细胞诱导的内皮细胞小管形成的影响。 5．用含不同浓度 IFN心或 Rg3的 1640及单独用 1640培养肺癌细胞，免疫 组化检测细胞表达bFGF的变化。 6．检测不同浓度的IFN心或Rg3对鸡胚尿囊膜血管新生血管形成的影响。 实验结果： 1．IFN吧浓度在 100u／ml以下时肺癌细胞和内皮细胞存活率无明显变化， IFN以浓度在 1000u／ml以上时肺癌细胞和内皮细胞存活率显著下降，且 浓度越高细胞存活率越低。 2．Rg3浓度在 25《00pg／ffil时两种细胞存活率均无明显变化。 3．用IFN亿和Rg3预处理的肺癌细胞条件培养液孵育的内皮细胞存活率显 著低于未处理组。 4．含IFN．a的条件培养液孵育的内皮细胞存活率与单独未处理条件培养液 组无明显差异，含 Rg3 50pg／thl以上的未处理条件培养液孵育的内皮细胞 存活率比单独未处理条件培养液组显著降低。 5．IFN－a浓度为 10ujml、100u／ml时复合培养中的小管形成较对照组（单独 用 M199）明显减少；Rg3浓度为 50pg／ffil、100pg／ffil、200pg／ffil时复合 培养中的小管形成也明显减少，浓度为25pg／ttil时小管形成无明显减少； 100u／ml的 IFN以与 50pg／ffil的 Rg3共同作用的复合培养中小管形成减少 最显著。 6．单纯用 1640培养的肺癌细胞免疫组化染色示 bFGF呈强阳性表达；干扰 素 （ 00u／ml）与 Rg3联合用药的肺癌细胞 bFGF呈弱阳性表达；干扰素 100u／ml单独作用的肺癌细胞 bFGF表达强于联合用药组，弱于单纯 1640 组；人参皂式Rg3 50收加 单独作用的肺癌细胞bFGF表达强于联合用 药组，弱于单纯1640组。 7．干扰素浓度在1000u／ml以上对尿囊膜血管新生有抑制作用，Rg3浓度在 50附加 以上对尿囊膜血管形成有抑制作用。 结论： 1．低浓度的 IFN－a （ 00u／ml以下）对肺癌细胞或人脐静脉内皮细胞增殖无 直接抑