疏筋解毒优化方对PD肝肾阴虚证大鼠的作用机制研究

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目的:通过建立PD肝肾阴虚证大鼠模型,观察疏筋解毒优化方对大鼠旋转行为,黑质组织病理形态,脑组织中DA、ACh含量以及血中cAMP、E2/T比值的影响。探讨:疏筋解毒优化方对PD肝肾阴虚证大鼠的作用机制及其治疗效果是否优于疏筋解毒方。为疏筋解毒优化方的临床应用提供实验研究基础。  方法:①动物模型的制备:选取健康成年SD大鼠100只,雄性,试喂养1周后,采用激怒法联合6-OHDA右侧纹状体两点注射法制备PD肝肾阴虚证大鼠模型。②分组及给药:将造模成功及假手术组大鼠纳入实验,随机分为假手术组、模型组、左旋多巴组(化药组)、疏筋解毒方组(原方组)、疏筋解毒优化方组(优化组)、熟地白芍组(熟芍组),共6组,假手术组及模型组每日给予生理盐水灌胃,药物干预组给予相应的药灌胃治疗28天。③实验指标观测:观察给药前后大鼠行为学改变;运用ELISA法测定cAMP、E2、T的含量;高效液相色谱-荧光检测法测定DA、ACh的含量;HE染色法观察PD大鼠黑质组织病理形态学改变。  结果:①假手术组大鼠治疗前后均无异常旋转行为;模型组治疗前后比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗干预组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);治疗后优化组与原方组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②DA含量:与模型组比较,化药组DA含量升高显著,差异具有统计学意义(P<0.01),中药组DA含量升高,差异具有统计学意义(P<0.O5;P<0.O1),与原方比较,优化方DA含量较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。ACh含量:与模型组比较,中药组ACh的含量降低,差异具有统计学意义(P<0.O1),化药组ACh含量降低不明显,差异无统计学意义(P>0.05);与原方比较,优化方ACh含量较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。③与模型组相比,中药组cAMP、E2/T比值下降,具有统计学意义(P<0.01),化药组cAMP、E2/T比值变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05);与原方组比较,优化组,熟地白芍组cAMP,E2/T比值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。④假手术组黑质区神经元密集,结构清晰,细胞数量较多,神经细胞形态正常。而模型组黑质区则出现显著的神经元受损,具体表现为细胞数量减少,结构排列紊乱,亦有部分神经细胞发生固缩,体积变小,形态不规则,出现部分胶质细胞浸润。化药组可见发生固缩的细胞,呈散在分布,部分胶质细胞浸润。优化组、原方组、熟芍组黑质内也出现神经元减少的现象,但较模型组比较神经细胞数量明显较多,发生固缩的细胞,数量较少,胶质细胞少量浸润。  结论:疏筋解毒优化方可以改善PD肝肾阴虚证大鼠的旋转行为,且效果优于原方。是通过增强机体免疫力,保护黑质神经细胞、促进黑质神经细胞修复,改善黑质纹状体的分泌功能以及调节多巴胺-乙酰胆碱系统的平衡,从而达到治疗PD肝肾阴虚证的效果。
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