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目的:制备载CD/TK基因PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体并研究其相关特性。
方法:用化学共沉淀法制备PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体,并优化纳米粒的制备工艺及其结合、保护质粒DNA的条件:探讨该纳米颗粒最佳的转染方式及其转染效率。采用MTT法研究载CD/TK基因纳米颗粒体外抑制肿瘤细胞的生长作用。
结果:PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体平均粒径202.6nm,分布均匀,无明显细胞毒性,与DNA的结合效率最高达93.56%,对质粒DNA有保护作用,能使外源基因在细胞内正常表达;MTT方法研究发现,AFP阳性的细胞在转染pAFP-CD/TK后对GCV和5-Fc的敏感性提高了10倍。
结论:PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体能有效转染pAFP-CD/TK质粒进入细胞,并在AFP阳性肝癌细胞中获得特异性表达,加用GCV和5-Fc后,不仅有效杀伤AFP阳性肝癌细胞,而且pAFP-CD/TK组的杀伤率与单独CD和单独TK组杀伤率相比显著提高。