目的：磷脂酰肌醇-3-激酶蛋白家族(PI3Ks)蛋白同免疫反应密切相关,其调节亚单位和催化亚单位的表达缺失或应用相应的PI3Ks抑制剂能够对免疫反应产生显著影响。其中,IA类PI3Ks调节亚单位能够通过其i-SH2结构域同相应的催化亚单位形成二聚体结构,进而调控催化亚单位的激酶活性。目前关于IA类PI3Ks亚单位对免疫反应尤其是炎症反应的调控作用存在较多争议,本论文旨在明确IA类PI3Ks调节亚单位p55PIK对炎症反应的调控作用,初步探讨蛋白p55PIK对炎症反应的调控作用的机制。方法：扩增并纯化表达蛋白p55PIK的腺病毒载体,在HaCat细胞内高表达蛋白p55PIK;通过在PMA诱导后的THP1细胞内转染蛋白p55PIK特异性的siRNA,降低蛋白p55PIK的表达。通过单独影响蛋白p55PIK的表达或者再次给予LPS(脂多糖)刺激,通过Q-PCR检测相应促炎细胞因子TNF-α, IL-1β, IL-6的转录水平的变化；通过ELISA试验检测相应促炎细胞因子TNF-α, IL-1β, IL-6的蛋白水平的变化；通过VWestern Blot检测]VFκB信号通路,PI3K/AKT通路,IKK信号通路以及MAPK信号通路的激活情况。结果：成功扩增并纯化表达蛋白p55PIK的腺病毒载体,成功筛选出蛋白p55PIK特异性的siRNA。在HaCat细胞内单独高表达p55PIK或者再次给予LPS刺激后均能够显著促进炎症因子转录和翻译(P<0.05),能够激活NFκB信号通路和PI3K/AKT通路,但对IKK信号通路以及MAPK信号通路无明显影响；在THP1细胞内单独低表达p55PIK或者再次给予LPS刺激后均能够显著抑制炎症因子转录和翻译(P<0.05),能够抑制NFκB信号通路和PI3K/AKT通路的激活,但对IKK信号通路以及MAPK信号通路无明显影响。结论：p55PIK能够通过激活NFκB信号通路促进免疫细胞炎症因子转录和翻译。高表达p55PIK能够促进LPS诱导的炎症因子转录,翻译以及NFκB信号通路和PI3K/AKT通路激活。低表达p55PIK能够抑制LPS诱导的炎症因子转录翻译,以及减少NFκB信号通路和PI3K/AKT通路的激活。目的：初步探讨蛋白p55PIK对炎症调控的相关机制。方法：构建高表达蛋白p55PIK的载体pcDNA3.1-p55PIK,构建NFκB RelA报告基因载体。通过在Hela细胞内转染NFκB RelA报告基因载体,同时低表达或者高表达蛋白p55PIK,观察蛋白p55PIK对NFκB RelA转录活性的影响。通过pcDNA3.1-p55PIK在Hela细胞内高表达蛋白p55PIK,通过p55PIK腺病毒载体在HaCat细胞内高表达蛋白p55PIK。通过胞核胞浆分离试剂盒将细胞内核浆组分区别,Western Blot检测胞核胞浆内蛋白p55PIK表达情况,NFκB信号通路以及PI3K/AKT信号通路激活情况。通过免疫共沉淀寻找免疫过程可能与蛋白p55PIK相结合的NFκB信号通路蛋白。结果：成功高表达蛋白p55PIK的载体pcDNA3.1-p55PIK,构建NFκB RelA报告基因载体。蛋白p55PIK能够促进NFκB RelA转录活性,能够正向调控LPS诱导的NFκB RelA转录激活。在Hela细胞内高表达蛋白p55PIK能够促进胞浆蛋白IKBα的降解,在HaCat细胞内高表达蛋白p55PIK能够促进胞核蛋白IKBα的降解同时促进胞浆NFκBp65磷酸化的增加。免疫过程例如pV,PMA作用细胞可能促进蛋白p55PIK与NFκB信号通路蛋白NFκB p65结合。结论：蛋白p55PIK能够通过促进NFκB RelA转录活性,正向调控炎症反应。蛋白p55PIK与NFκB信号通路蛋白NFκB p65可能在免疫过程例如pV,PMA作用中相互结合。目的：观察穿膜融合多肽IP55预处理对免疫细胞(单核巨噬细胞系以及原代单核巨噬细胞)相应促炎因子产生的影响以及相关信号通路激活的影响。观察穿膜融合多肽IP55预处理对LPS诱导的免疫细胞促炎因子释放的影响。初步探索穿膜融合多肽IP55体内的炎症治疗作用。方法：构建穿膜融合多肽IP55的原核表达载体,利用蛋白质纯化技术和内毒素去除技术纯化穿膜融合多肽IP55,以穿膜融合多肽IP55作用于单核巨噬细胞系以及原代单核巨噬细胞后观察对相应促炎因子TNF-α,IL-6以及IL-1p产生的影响以及相应信号通路的变化。动物实验观察穿膜融合多肽IP55预防性治疗对LPS诱导的急性小鼠肝损伤的保护作用。结果：成功构建穿膜融合多肽IP55的原核表达载体pTAT-N15,在血液系统肿瘤细胞系Jurkat以及实体肿瘤Hela,IP55均能够高效进入细胞,抑制肿瘤细胞细胞周期进程,抑制细胞内DNA合成；在单核巨噬细胞系THP1中,穿膜融合多肽IP55预处理对促炎因子产生无明显影响(P>0.05),对NFκB信号通路无激活,但能够显著抑制LPS诱导的单核巨噬细胞THP1促炎因子TNF-α,IL-6以及IL-1β产生(P<0.05),部分抑制对NFκB信号通路的激活；在原代单核巨噬细胞内能够部分抑制LPS诱导的单核巨噬细胞THP1促炎因子TNF-α产生(P<0.05),对其他促炎因子产生影响无统计学意义(P>0.05)。体内实验中,穿膜融合多肽IP55能够部分抑制LPS诱导的肝脏细胞NFκBp65的核转位,降低LPS诱导的小鼠急性肝损伤造成的小鼠死亡率结论：穿膜融合多肽IP55能有效进入细胞,抑制肿瘤细胞细胞周期进程,抑制DNA合成；在单核巨噬细胞系采用穿膜融合多肽IP55预处理能够显著抑制LPS诱导的促炎因子TNF-α,IL-6以及IL-1β产生；在原代单核巨噬细胞采用穿膜融合多肽IP55预处理能够部分抑制LPS诱导的单核巨噬细胞THP1促炎因子TNF-α产生；在LPS诱导的小鼠急性肝损伤模型采用穿膜融合多肽IP55预处理能够部分抑制LPS诱导的肝脏细胞NFκB p65的核转位以及减少急性肝损伤造成的小鼠死亡。