【摘 要】
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目的: hTERT反义寡核苷酸通过脂质体转染入乳腺癌细胞,观察其对MCF-7细胞端粒酶活性、细胞周期、细胞凋亡和癌基因bcl-2的影响,探讨hTERT反义寡核苷酸对MCF-7细胞增值的影响
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目的: hTERT反义寡核苷酸通过脂质体转染入乳腺癌细胞,观察其对MCF-7细胞端粒酶活性、细胞周期、细胞凋亡和癌基因bcl-2的影响,探讨hTERT反义寡核苷酸对MCF-7细胞增值的影响及其影响机制,为乳腺癌的基因治疗提供理论依据。 方法: 本实验以体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,观察hTERT反义寡核苷酸对乳腺癌细胞增殖的影响;利用脂质体介导hTERT反义寡核苷酸转染MCF-7细胞,采用多聚酶链式反应-酶联免疫测定法(PCR-ELISA)检测乳腺癌细胞端粒酶活性;通过MTT法检测细胞增殖活性;以流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡;用免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白的表达,用平板集落形成实验检测细胞集落的形成。 结果: 1.MTT法检测结果显示:ASDON不同浓度组间细胞增殖抑制率差异有显著性(P<0.01),且随浓度的增加,其抑制作用增强;并且ASDON作用不同时间对细胞增殖抑制率不同,72h组的抑制率高于48h和24h组的抑制率(P<0.01),而对照组、正义寡核苷酸组、脂质体组对细胞的增殖无抑制作用。 2.平板集落形成实验结果显示,反义寡核苷酸可使细胞集落形成率降低,抑制率为66.6%,高于正义寡核苷酸、脂质体组、对照组的抑制率(P<0.01),表明ASODN对MCF-7细胞集落形成能力有明显的抑制作用。
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