金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是一种常见的食源性致病菌,容易引起人和动物的中毒和感染。抗生素的广泛使用,促进了细菌耐药性的发展,畜禽动物中定植的金黄色葡萄球菌及其携带的耐药性可通过食物链传递给人类,影响食品安全和人类健康。目前,金黄色葡萄球菌已经在猪肉生产不同的环节中有所报道,但它的污染和耐药性情况随食品链的传播变化缺乏系统深入的研究。本研究以猪肉生产链中养殖场、屠宰场和市场中分离得到的金黄色葡萄球菌为研究对象,通过药敏纸片法和微量肉汤稀释法检测其对常用抗生素的耐受情况,再依据耐药表型,采用PCR方法检测相应耐药基因的携带情况,最后采用MLST及spa两种分子方法进行分型,研究结果如下:(1)养殖场内金黄色葡萄球菌的流行特征研究。实验从养殖场内采集样本共168份,共分离得到29株金黄色葡萄球菌,分离率为17.3%,MRSA阳性率为1.2%。药敏试验表明,菌株对青霉素、庆大霉素、四环素、克林霉素、克拉霉素、复方新诺明、环丙沙星、莫西沙星的耐药率均大于90%,多重耐药率为100%,主要耐七大类抗生素(22/29),共形成11个不同的耐药谱。对基因blaZ、ant(4′)-Ia、aadE、aacA-aphD、aac(6’)/aph(2”)、tetL、lnuB、lsaE和dfrG的检出率最高,分型结果表明,盛行的MLST及spa型别为ST9-t889型。(2)屠宰场内金黄色葡萄球菌的流行特征研究。实验从屠宰场内采集样本共173份,结果表明,共分离得到62株金黄色葡萄球菌,分离率为35.8%,MRSA阳性率为5.2%。菌株对青霉素耐药率为98.39%,对庆大霉素、四环素、克林霉素、克拉霉素、和复方新诺明的耐药率为20~45%,共形成18个不同的耐药谱。菌株对blaZ、ant(4′)-Ia、aacA-aphD、catI、tetK、tetL和lsaE的检出率最高。主要的MLST及spa型别为ST188-t189。(3)市场内金黄色葡萄球菌的流行特征研究。实验从市场内采集样本共160份,结果表明,共分离得到37株金黄色葡萄球菌,分离率为23.1%,MRSA阳性率为6.3%。药敏试验表明,菌株对青霉素、氯霉素、四环素、克林霉素和克拉霉素的耐药率均大于50%。多重耐药率为72.97%(27/37),耐药模式多样和分散,共形成27个不同的耐药谱。对基因blaZ、ant(4′)-Ia、aacA-aphD、catI、tetK和lsaE的检出率最高,ST7-t091型为优势型别。(4)猪肉生产链中金黄色葡萄球菌的流行特征研究。实验从养殖、屠宰和零售环节中共采样501份,研究表明,金黄色葡萄球菌的检出率为25.6%(128/501),MRSA的阳性率为4.2%(21/501)。128株金黄色葡萄球菌对青霉素(99.22%)、庆大霉素(40.63%)、四环素(63.28%)、克林霉素(57.03%)、克拉霉素(57.03%)、复方新诺明(43.75%)、环丙沙星(39.06%)、莫西沙星(33.59%)的耐药率较高,对头孢噻吩(3.13%)、苯唑西林(8.59%)、头孢西丁(11.72%)、氯霉素(25.00%)、米诺环素(12.50%)、利福平(12.50%)、左氧氟沙星(20.31%)的耐药率较低,对利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀以及万古霉素均敏感。除青霉素和头孢噻吩外,三个不同环节分离所得的金黄色葡萄球菌对其他抗生素的耐药率均具有极显著差异。多重耐药率为59.4%(76/128),共形成51种不同的耐药谱。除青霉素外,其他类型抗菌药物的耐药表型和基因型并不完全一致。分型结果显示,试验共发现了五种新的ST型别,分别是ST4292,ST4293,ST4294,ST4295以及ST4297。共形成20种不同的ST型别和17种不同的spa型别,其中ST9-t889(30.5%)最为盛行。综上所述,生猪屠宰和猪肉加工过程中存在外来的交叉污染,而生猪和猪肉是金黄色葡萄球菌污染传播的重要载体。研究为动物性食品源金黄色葡萄球菌的风险评估提供了基础数据。