【摘 要】
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目的:1.观察棕榈酸（Palmitate acid,PA）对人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）炎症反应及细胞活性的影响;2.明确β-羟基丁酸（β-hydroxybutyrate,β-HB）对人脐静脉内皮细胞炎症反应的影响;3.探究β-羟基丁酸对血管内皮细胞炎症反应的作用机制,以此了解β-羟基丁酸在动脉粥样硬化发病中的作用。方
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目的:1.观察棕榈酸（Palmitate acid,PA）对人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）炎症反应及细胞活性的影响;2.明确β-羟基丁酸（β-hydroxybutyrate,β-HB）对人脐静脉内皮细胞炎症反应的影响;3.探究β-羟基丁酸对血管内皮细胞炎症反应的作用机制,以此了解β-羟基丁酸在动脉粥样硬化发病中的作用。方法:1.在适宜条件下培养HUVEC细胞,分组:（1）空白对照组（2）溶剂对照组（3）0.1mmol/L PA溶液（4）0.4mmol/L PA溶液（5）0.8mmol/L PA溶液（6）1.2mmol/L PA溶液,处理24小时后进行如下检测:CCK8检测细胞活性,ELISA检测炎症介质IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平。2.在适宜条件下培养HUVEC细胞,分组:（1）空白对照组（2）0.8mmol/L PA溶液（3）0.8mmol/L PA溶液+0.02mmo/Lβ-羟基丁酸（4）0.8mmol/L PA溶液+0.2mmo/Lβ-羟基丁酸（5）0.8mmol/L PA溶液+2mmo/Lβ-羟基丁酸,处理24小时后进行以下检测:Western Blot检测LC3-I、LC3-II、P62水平,ELISA检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平,CCK8检测细胞活性。3.在适宜条件下培养HUVEC细胞,分组:（1）空白对照组（2）0.8mmol/L PA溶液（3）0.8mmol/L PA溶液+2mmo/Lβ-羟基丁酸（4）0.8mmol/L PA溶液+2mmo/Lβ-羟基丁酸+5mmol/L 3-MA（5）0.8mmol/L PA溶液+2mmo/Lβ-羟基丁酸+100nmol/L雷帕霉素,处理24小时后进行以下检测:Western Blot检测LC3-I、LC3-II、P62水平,ELISA检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平,CCK8检测细胞活性。结果:1.棕榈酸处理后的人脐静脉内皮细胞中炎症介质IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的水平较空白对照组上调,而细胞活性与棕榈酸浓度呈负相关。2.在经棕榈酸诱导后的人脐静脉内皮细胞中,自噬标记物LC3-I、LC3-II水平较对照组升高,P62蛋白水平降低;使用β-羟基丁酸处理后的炎症介质的水平较PA对照组减少,细胞活性受抑制情况改善,且自噬标记物LC3-I、LC3-II水平较PA对照组降低,P62蛋白水平升高。3.自噬抑制剂3-MA可增强β-羟基丁酸的抗炎效果,自噬激动剂雷帕霉素则效果相反。结论:1.棕榈酸可以诱导人脐静脉内皮细胞炎症反应,同时使细胞活性减低;2.棕榈酸可以诱导人脐静脉内皮细胞自噬反应;β-羟基丁酸处理棕榈酸诱导过的HUVEC后,细胞中炎症反应改善,同时使细胞活性较PA组升高,其机制可能与β-羟基丁酸抑制受损人脐静脉内皮细胞的自噬流与自噬通量有关。
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