本文是国家“十五”攻关重大项目“科学仪器研制与开发”中“色谱仪与专用部件的研制与开发”子课题的部分工作。 近年来，随着人们对糖类物质生物功能的不断深入了解，糖类方法学研究已成为当今化学家和生物学家的研究“热点”，而高效液相色谱技术又是糖类方法学研究的重要组成部分。该论文选择1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)作为柱前衍生化试剂进行糖类物质分离分析的研究。在前人的工作基础上，采用简化的柱前衍生化方法，使反应时间缩短近1／3，减少了衍生产物的损失。优化选择反应温度，反应时间，衍生试剂PMP和NaOH用量等衍生化条件，最终确立的衍生化方法条件温和，衍生化反应产率高。使用质谱扫描确定反应生成1：2结构形式的糖-PMP衍生产物，无立体异构体，并对衍生产物稳定性加以评价，结果表明PMP柱前衍生化方法能够满足实际样品常规分析的要求。结合建立的衍生化方法与高效液相色谱HPLC，优化分离条件，并选择紫外(UV)和电喷雾—离子阱质谱(ESI-MS)两种检测模式对实际样品中所含的单糖进行分离分析，建立了5种单糖的常规定性定量方法。也采用毛细管胶束电动力学色谱(MEKC)分离单糖衍生物，与HPLC分离的结果加以比较，说明了MEKC和HPLC应用于单糖分离分析的特征，确立了分离模式选择的基本框架。PMP柱前衍生法用于还原性双糖的衍生，同样能取得较好的结果。实验表明，建立的PMP柱前衍生—HPLC分离—ESI-MS检测方法可以作为聚糖研究方法，能够很好的说明其“结构单元”—摘要单糖的组成。