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乳腺癌严重危险女性健康,然而传统治疗效果有限,急需新的肿瘤疗法。目前,非编码RNA在肿瘤发生机制中的研究以及应用其抑制剂靶向治疗癌症成为一大焦点,其中Z38基因的抑制剂(反义核酸、si-RNA等)被证明通过抑制Z38在肿瘤细胞中表达有效杀死肿瘤细胞而对正常细胞无异:同时,随着PD-1/PD-L1信号通路被不断阐明,应用PD-1或者PD-L1的特异性单抗阻断PD-1/PD-L1负性调控信号通路,从而达到治疗癌症的目的,也已经成为热点。本文以Z38和PD-L1为对象,研究Z38和PD-L1在乳腺癌细胞中的相关性,目的在于:通过PD-L1在肿瘤细胞中的分子机制研究Z38在各肿瘤细胞中可能存在的分子机制。Z38自发现以来,关于通路机制方面的研究成果甚少,证实PD-L1和Z38的相互关系可帮助研究Z38的机制;通过Z38与PD-L1相关通路机制中,从Z38入手研发抑制剂阻断肿瘤细胞中PD-1/PD-L1信号通路,从而治疗肿瘤。本文具体开展以下工作:第一,在乳腺癌细胞系中,检测三种乳腺癌细胞中PD-L1和Z38的表达量,筛选研究材料。第二,在干扰Z38的乳腺癌稳转细胞株中检测肿瘤细胞增殖能力。第三,构建及鉴定干扰PD-L1的乳腺癌稳转细胞株,检测肿瘤细胞的增殖能力、T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤能力及T淋巴细胞的增殖活性。第四,分别检测干扰Z38细胞株和干扰PD-L1细胞株中另一个基因的表达量,并用RIP实验检测Z38和PD-L1之间是否存在互作。取得的实验成果如下:第一,Z38和PD-L1在乳腺癌MDA-MB-231细胞中相对表达较高;第二,干扰Z38乳腺癌稳转细胞株的增殖能力下降。第三,成功构建干扰PD-L1慢病毒体系并构建干扰PD-L1乳腺癌MDA-MB-231稳转细胞株,PD-L1干扰株的肿瘤增殖活性下降,T淋巴细胞对其的肿瘤杀伤能力增强,并且干扰株促进了T淋巴细胞的增殖能力。第四,干扰Z38稳转细胞株中,PD-L1的表达量降低;在干扰PD-L1稳转细胞株中,Z38的表达量也呈下降趋势。RIP实验直接证明了 PD-L1和Z38相互作用的关系。本研究主要得到了可促进T淋巴细胞增殖的干扰PD-L1的乳腺癌稳转细胞株,并通过qPCR、Western Blot、RIP实验证明了 PD-L1和Z38存在直接联系,为后续实验打下基础。