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猪的繁殖性状是一类重要的经济性状,繁殖性能的高低直接影响到养猪业的经济效益。研究表明,催乳素受体(PRLR)基因和促卵泡素β亚基(FSHβ)基因是影响猪繁殖性能的主基因或候选基因。本课题主要研究这两个基因的遗传变异以及对猪繁殖性能及其他生产性状的影响,探讨这两个基因在猪育种工作中的应用。 1.本研究根据人、家鼠、兔子、牛和猪等动物的已公布的PRLR基因mRNA或cDNA的同源比较结果,设计3对引物扩增了猪PRLR基因exon8～exon10片段,测序结果表明该区域长3637bp,包括部分exon8序列(68bp)、intron8(507bp)、exon9(70bp)、intron9(1816bp)和exon10的全部编码区和部分3′非编码区(1176bp)。 2.根据猪PRLR基因的exon8～exon9序列,设计P4、P5和P63对引物,利用PCR-SSCP结合克隆测序技术检测了猪PRLR基因exon8～exon9区域多态性,共检测到15处突变,都位于猪PRLR基因intron8内,分别是猪PRLR基因intron8第26位C→T突变,第47位的A→G突变,第54位的C→T突变,第63位的G→A突变,第68位的A→G突变,第99位的C→T突变,第134位的三个A的插入突变,第153位的T→C突变,第244位的A→G突变,第292位的C→T突变,第402位的G→A突变,第410位的A→G突变,第412位的AACC缺失突变,第421位的T→C突变,第483位的T→C突变。 根据猪PRLR基因exon10序列设计P7和P8两对引物,利用PCR-RFLP和克隆测序技术检测了该区域的多态性。P7引物扩增片段内没有检测出突变。P8引物的扩增片段共检测到3处突变,分别为exon10第766位的T→C无义突变,该突变能引起HpaⅡ酶切片段长度多态性。第935位的A→G错义突变,能引起PRLR分子中丝氨酸(S)向甘氨酸(G)的转变,且能引起AluⅠ酶切片段长度多态性。第1138位的A→G突变发生在PRLR基因的3′非翻译区内。 3.以杜洛克猪、长白猪、大白猪、山西白猪共127头母猪的381窝产仔记录为实验材料,利用最小二乘分析,研究了PRLR基因各多态位点对猪产仔数性状的影响。结果表明,P4和P5位点上不同基因型母猪总产仔数和产活仔数无显著差异(P>0.05)。P6位点上,AA、AB、AC和BB基因型母猪的头胎总产仔数显著高于BC型(P<0.05),其中AC型最高,为10.69头,AA型次之,为9.83头。综合该位点对其他性状的影响,认为A基因为提高产仔数的有利基因,AA型母猪为有利基因型。P8位点上,不同基因型母猪总产仔数和活产仔数无显著差异,但有AA>AB>BB的趋势,与国内外研究结果一致。 4.以山西白猪选育过程中四、五世代369头仔猪的初生重和乳头数资料,152头后备