烟草曲茎病毒侵染及传播机制研究

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烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus, TbCSV)是菜豆金色花叶病毒属的一个新种,隶属于植物病毒中的双生病毒科,在云南省广泛发生且在多种经济作物上产生严重危害,是引起云南番茄和烟草曲叶病的重要病原,能够通过烟粉虱扩散在多种植物之间迅速传播。双生病毒病害的发生与传播离不开其传播媒介及宿主植物。本文以烟草曲茎病毒为研究对象,传播媒介选取两烟粉虱隐种(入侵型MEAM1和本地种群Asia1),宿主植物选取普通烟和番茄,研究TbCSV通过媒介烟粉虱侵染及传播机制。  本研究主要内容包括:⑴TbCSV被烟粉虱隐种MEAM1获取最短的时间为0.5h,而被烟粉虱隐种AsiaI的最短获取时间是1h,TbCSV被两隐种烟粉虱的获毒率均随饲毒时间的延长而增加,当饲毒时间为48h时,TbCSV在两隐种烟粉虱中的获毒率均达到100%。TbCSV一旦被烟粉虱获取,其可在烟粉虱隐种MEAM1体内存留20天左右,而在烟粉虱隐种AsiaI体内可终身存留。无论是烟粉虱隐种MEAM1或是AsiaI,TbCSV均不能被单头烟粉虱传播于健康的普通烟或番茄植株上,但可被5头以上带毒烟粉虱成功地传播于健康的番茄及普通烟植株上,传毒效率随着用于传毒烟粉虱个体数量的增加而略有增加。⑵采用PCR方法检测了TbCSV DNA在带毒媒介烟粉虱头、中肠、血淋巴和唾液腺中的存在情况,得知 TbCSV在烟粉虱体内的循环途径为头→中肠→血淋巴→唾液腺。TbCSV的病毒颗粒首先被烟粉虱经口针吸取,进入食管短暂停留后到达消化道,穿越了介体肠膜的屏障后进入血淋巴,随体液扩散到唾液腺,最后在唾管内病毒与唾液混合再经唾管排出体外,为持久性循环传播。病毒侵染宿主植物后的循环路径分子检测结果表明,病毒粒子主要在宿主植物的茎和叶面存留并引起典型病毒病发病症状。⑶TbCSV侵染普通烟后,可导致烟粉虱隐种MEAM1在毒株上的产卵量较其在无病毒植株上的明显增加,寿命也随之延长;而对本土类型烟粉虱隐种AsiaI的生殖没有明显影响,但可以延长其寿命。在TbCSV侵染或健康的普通烟植株上,烟粉虱两隐种发育历期之间的差异不显著。寄主植物中TbCSV的侵染有利于传毒媒介烟粉虱的增殖,烟粉虱种群数量的增长进而又促进了TbCSV的快速传播。
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