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目的:观察补肾调周法对卵巢早衰(Premature Ovarian Failure,POF)模型大鼠卵巢Fas、Fas配体(Fas Ligand, FasL)的影响,探讨补肾调周法调节POF模型大鼠卵巢Fas、FasL系统平衡的作用机理。
方法:将90只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、补肾I号方高剂量组、补肾 I号方低剂量组、补肾 II 号方高剂量组、补肾 II 号方低剂量组、补肾调周高剂量组、补肾调周低剂量组9组,每组10只。除空白对照组外其余各组采用环磷酰胺腹腔注射,建立卵巢早衰大鼠模型。空白对照组和模型对照组每日灌胃蒸馏水20ml/kg·d;阳性对照组每日灌胃己烯雌酚0.17mg/kg·d;补肾I号方(高剂量组灌胃给药68.67g/kg·d,低剂量组灌胃给药34.34g/kg·d);补肾II号方(高剂量组灌胃给药61.40g/kg·d,低剂量组灌胃给药30.70g/kg·d);补肾调周高剂量组序贯灌胃补肾Ⅰ号方和补肾Ⅱ号高剂量(D1-2天补肾Ⅰ号方, D3-4天补肾Ⅱ号方,依此类推给药);补肾调周低剂量组序贯灌胃补肾Ⅰ号方和补肾Ⅱ号方低剂量(D1-2 天补肾Ⅰ号方,D3-4 天补肾Ⅱ号方,依此类推给药)。给药20天后,免疫组化法测定各组大鼠卵巢Fas、FasL水平,并对卵巢进行病理组织学观察。
结果: 在卵巢病理组织学方面,模型对照组与空白对照组相比,卵巢体积缩小,皮质内各级发育卵泡少见,颗粒层细胞明显减少或消失,黄体组织减少,说明模型复制成功。补肾调周各剂量组使卵巢颗粒细胞层增厚,黄体组织数量增多,阳性对照组、补肾Ⅰ号方各剂量组、补肾Ⅱ号方各剂量组卵巢形态学修复不如补肾调周各剂量组。从而说明补肾调周法能更好改善 POF 模型大鼠卵巢早衰征象,促进卵泡生长、排卵及黄体发育,进而改善卵巢功能。药理学研究显示:与模型对照组相比,补肾Ⅰ号方各剂量组、补肾Ⅱ号方各剂量组、阳性对照组在提高卵巢Fas、降低卵巢FasL水平方面,差异有显著的统计学意义(P<0.05);补肾调周各剂量组差异具有极显著的统计学意义(P<0.01),但补肾调周各剂量组间无显著性差异(P>0.05)。表明补肾调周法能显著提高卵巢Fas、降低卵巢FasL水平,提示补肾调周法能调节 POF 模型大鼠卵巢 Fas、FasL 系统平衡,并且调节效果优于单独应用补肾Ⅰ号方或补肾Ⅱ号方。
结论:补肾调周法可以增加卵巢颗粒细胞的层数,可对卵巢 Fas、FasL 表达水平进行良性调节,表明补肾调周法具有调节 POF 模型大鼠卵巢 Fas、FasL 系统平衡,恢复卵巢生殖内分泌功能的作用,且治疗效果优于单一的补肾方剂,这可能是临床治疗POF的机制之一。