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目的1.观察慢性MPTP帕金森病小鼠模型炎症反应的病理情况。2.评价优化核酸疫苗(pVAX1-IL-4/SYN-B)预防接种对小鼠MPTP损害的神经保护作用。3.探讨优化核酸疫苗免疫对MPTP帕金森病小鼠模型炎症反应的影响特点，进一步评价优化核酸疫苗预防免疫的有效性和安全性。方法抽取并制备足量pVAX1-IL-4/SYN-B和pVAX1。将C57BL/6正常小鼠随机分为正常对照组、PBS模型组、空质粒模型组、优化核酸疫苗模型组4组，分别在小鼠双后肢胫前肌肌注PBS、PBS、空质粒、pVAX1-IL-4/SYN-B各100ul进行预防免疫，共免疫3次。末次注射3周后，后3组背部皮下注射MPTP构建慢性帕金森病小鼠模型，正常对照组注射同体积的PBS。末次给药后观察小鼠行为学变化；免疫组织化学、Western blot检测小鼠黑质部TH、CD11b、 COX-2表达情况；RT-PCR检测小鼠黑质TNF-α、IL1-β炎症因子mRNA水平。结果1.在预防免疫接种阶段，未发现小鼠行为异常。但在采用MPTP构建帕金森病小鼠模型过程中，各模型组小鼠出现尾巴上翘、僵硬，肢体抖动、强直，活动减少、缓慢，躯体蜷缩、震颤等类帕金森病样症状。与PBS模型组和空质粒模型组相比，优化核酸疫苗模型组小鼠上述行为学异常有明显改善。2.免疫组织化学显示各模型组小鼠黑质TH神经元明显减少，Western Blot结果和免疫组化一致。优化核酸疫苗模型组TH丢失较PBS模型组和空质粒模型组明显减少，差异有统计学意义。3．免疫组织化学显示各模型组小鼠黑质及皮质等部位有大量CD11b、COX-2炎症细胞侵润；与PBS模型组和空质粒模型组相比，优化核酸疫苗模型组CD11b、COX-2细胞数及蛋白定量水平明显减少，差异有统计学意义。4．RT-PCR显示：优化核酸疫苗模型组TNF-α、IL1-β炎症介质的mRNA水平较PBS模型组、空质粒模型组表达明显降低；差异有统计学意义。结论从以上结果可以看出各模型组小鼠表现出类帕金森病样症状，TH神经元明显减少，说明慢性MPTP帕金森病模型构建成功；各模型组中炎症细胞及炎症介质的表达表明MPTP诱导小鼠中脑黑质产生了炎症反应；pVAX1-IL-4/SYN-B预防性免疫减少了MPTP模型小鼠黑质TH神经细胞的丢失及炎症因子和炎症细胞表达，对MPTP诱导的小鼠慢性损害有一定的保护及抗炎作用，为优化核酸疫苗的进一步在临床上的应用研究奠定了理论基础。