【摘 要】
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从土壤和保藏菌株中筛选出100多株对反式-4-甲氧基苯基缩水甘油酸甲酯(MPGM)具有水解酶活性的菌株,其中粘质沙雷氏菌ECU1010所产的胞外脂肪酶表现出最高的立体选择性(E值>100
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从土壤和保藏菌株中筛选出100多株对反式-4-甲氧基苯基缩水甘油酸甲酯(MPGM)具有水解酶活性的菌株,其中粘质沙雷氏菌ECU1010所产的胞外脂肪酶表现出最高的立体选择性(E值>100).在摇瓶中对沙雷氏菌ECU1010的菌体生长和产酶过程进行了优化,酶活由初始的500 u/l上升到4780 u/l,提高了9.5倍.其理想的碳、氮源分别为吐温-80和蛋白胨,适宜的碳氮比为1:3.根据沙雷氏菌ECU1010所产胞外脂肪酶易于失活的特点,确定其培养的适宜条件为25℃和pH6.5,在此条件下酶活特别是比活得到了较大的提高.将发酵液上清(粗酶液)直接用环氧树脂No.8244进行了固定化,使其稳定性显著提高,连续反应5批后酶活虽略有下降,但5批反应中剩余底物的对映体过量值(ee<,s>)均在97％以上;该固定化酶在30℃的半衰期为17批(或238 h).对沙雷氏菌ECU1010脂肪酶在水-有机溶剂两相体系中催化拆分(±)-MPGM的反应进行了优化.
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