论文部分内容阅读
背景与目的食管癌(esophageal carcinoma)是人类常见的上消化道恶性肿瘤,严重危害着人们的健康。中国是世界上食管癌的高发国家,也是世界上食管癌高死亡率的国家之一,每年约有15万人死于食管癌,其中约90%以上为鳞状细胞癌。流行病学及病因学研究证实,食管癌的发生与饮食习惯、生活环境、遗传因素、性别、年龄、职业、种族、地理等均有密切关系。随着分子生物学的发展,研究发现食管癌的发生发展涉及到多个基因的异常改变,是原癌基因的激活与抑癌基因的失活长期协同作用的结果。蛋白酪氨酸激酶(PTKs)是一组能催化底物蛋白酪氨酸残基磷酸化的酶蛋白,参与许多信号转导途径,其中在控制细胞分化、增殖和扩散中起重要作用。目前已发现90余种PTKs具有癌基因功能,然而脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase, SyK)是目前发现的唯一具有抑癌作用的PTKs。最近多项研究表明,SYK表达缺失可能与多种肿瘤的形成和转移相关。Ki67即细胞增殖核相关抗原(nuclear associated antigen ki67)是增殖细胞核中的一种非组蛋白性核蛋白,由两条多肽链构成,存在于整个细胞周期,其表达随细胞周期不同时期而异。在细胞静止GO期无表达,G1中期到晚期出现,S期到G2期逐步增加,M1期达到高峰,M期后迅速降解或丢失抗原决定簇。Ki67是一种目前最常使用反映增殖细胞增殖水平的标记之一,也是学者们正在研究的热点癌基因之一。目前国内对SyK、Ki67在食管癌中表达的相关性研究报道不多,同时对SyK和Ki67在食管癌中表达的研究国内尚未见报道,它们与食管癌发生、发展,浸润转移之间的关系尚不十分清楚。为此,本实验采用RT-PCR方法检测食管癌与癌旁组织中SyK及Ki67的表达情况,探讨在肿瘤发生发展过程中的作用,并分析两者之间的相关性,以期为研究食管癌发生、发展机理及临床治疗提供理论依据。材料与方法1.采集2010年6月-2010年12月份郑州大学第二附属医院胸外科接受手术治疗的部分食管癌患者,标本包括肿瘤组织48例及相应癌旁正常食管组织48例。全部病例有完整的临床资料及明确的病理诊断,术前均未行化疗或放疗。2.应用RT-PCR的方法检测48例食管癌肿瘤组织及48例癌旁正常组织中SyK、Ki67基因表达情况。并结合临床病理特征,分析48例肿瘤组织中SyK、Ki67 mRNA的表达与临床病理特征的关系。3.应用spss10.0版软件包,采用t检验、方差分析及Spearman相关分析进行统计学分析,α=0.05为检验水准。结果1.癌组织中Syk mRNA的表达强度显著低于癌旁正常组织,(0.859±0.105vs1.165±0.154, P<0.05),差异有统计学意义。2.癌组织中Ki67 mRNA的表达强度显著高于癌旁正常组织,(1.007±0.111vs0.432±0.067, P<0.05),差异有统计学意义。3. Syk mRNA在有淋巴结转移的食管癌组织中和无淋巴结转移的食管癌组织中的表达分别为(0.803±0.78、0.944±0.083, P<0.05),差异有统计学意义。Syk mRNA在高分化组、中分化组、低分化组的表达分别为,(0.987±0.057、0.852±0.066、0.761±0.082, P<0.05),差异有统计学意义；且Syk mRNA的表达强度与食管癌的TNM分期有关,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期各组之间的表达量分别为(0.970±0.075、0.841±0.63、0.745±0.071, P<0.05)各组间差异有统计学意义。Syk mRNA的表达与患者的性别、年龄之间无明显差异。4. Ki67 mRNA在有淋巴结转移的食管癌组织中和无淋巴结转移的食管癌组织中的表达分别为(1.021±0.022、0.986±0.021,P>0.05),差异无统计学意义。Ki67mRNA在高分化组、中分化组、低分化组的表达分别为(0.890±0.057、0.989±0.061、1.140±0.078,P<0.05),差异有统计学意义；且Ki67 mRNA的表达强度与食管癌的TNM分期无关,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期各组之间的表达量分别为(0.968±0.126、1.011±0.070、1.053±0.157, P>0.05),各组间差异无统计学意义。Ki67 mRNA的表达与患者的性别、年龄之间无明显差异。5.Pearson相关性分析显示,癌组织中Syk mRNA表达与Ki67mRNA表达之间呈负相关(r=-0.218,P<0.05)。结论1.SyK mRNA在正常组织中呈现为高表达,在食管鳞状细胞癌呈现低表达,与食管癌分化程度、淋巴结转移、临床病理分期密切相关。2.Ki67 mRNA在正常组织中呈现为低表达,在食管鳞状细胞癌均呈现高表达,与食管癌分化程度有关,与淋巴结转移、临床病理分期无关。3.SyK、Ki67在食管鳞癌组织中的表达呈负相关。4.SyK、Ki67有望成为治疗食管鳞癌的新靶点。