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背景深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT)是临床常见的静脉系统血栓性疾病,其最严重的并发症是血栓随静脉回流至肺动脉,导致肺动脉血栓栓塞症(pulmonary thromboembolism,PTE)的发生,PTE的高发病率、高死亡率和高误诊率严重危害人类健康。DVT和PTE共称为静脉血栓栓塞症(venous thromboembolism,VTE)。VTE的发病原因并不十分清楚,正常状态下人体凝血-纤溶系统之间处于动态平衡,如果某些先天性或继发性的因素使这种平衡失调,则容易导致血栓形成或出血。抗凝蛋白系统是体内抗凝的主要成分之一,蛋白C(protein C,PC)系统缺陷可引发PTE及DVT,常作为与遗传因素相关,被认为是PTE发生的独立危险因素。蛋白Z(protein Z,PZ)属抗凝蛋白,与其作用机制相关的蛋白Z依赖的蛋白酶抑制剂(protein Z dependent proteaseinhibitor,ZPI),在PTE过程中作用报道不一,关系不确定。
目的本研究以PTE患者为研究对象,探讨PC系统、PZ及其相关因子mRNA在PTE过程中的表达。
方法收集20例PTE患者和性别、年龄基本匹配的20例对照组的新鲜静脉血样,抽提、纯化血样总RNA,分别合成Cy3标记的20个PTE患者和20个对照者的cRNA探针,并分别与44K Agilent全人类基因组oligo芯片杂交,杂交后进行图像扫描和数据分析,通过两类样本比较随机方差参数T检验,得到两组间PC系统、PZ及其相关因子mRNA的差异表达信息。并采用FQ-PCR对部分基因的芯片检测结果进行反检测以验证基因芯片的可靠性。
结果两组比较PTE组中,PCmRNA表达上调者有11例(占55%),下调者9例(占45%),结果比较没有统计学意义;PSmRNA表达上调者9例(占45%),下调者11例(占55%),结果比较没有统计学意义;TMmRNA表达上调者12例(占60%),下调者8例(占40%),结果比较没有统计学意义(P>0.05);EPCR在PTE组中mRNA表达下调者14例(占70%),上调者6例(占30%),显示EPCR平均值在PTE患者中其mRNA表达下调显著(P=0.01527)。
两组比较PTE组PZmRNA下调的为13例(占65%),上调的为7例(占36%),结果比较没有统计学意义:FX mRNA表达上调的为7例(占36%),下调的13例(占65%),统计学比较也未有显著差异;ZPImRNA表达下调的有15例(占75%),上调的有5例(占25%),经统计学分析差异显著(P<0.05)。结论PTE组与对照组比较PC、PS、TM、PZ、FXmRNA未有显著下调,EPCR、ZPImRNA下调显著,提示PC、PS、PZ、FX的mRNA信号表达未对PTE的血栓形成起作用,PTE的血栓形成有其特殊性。