原发性肝细胞肝癌(HCC)是世界上第六大常见肿瘤,肝癌的发生发展与许多因素相关,例如:病毒性肝炎,肝硬化,长期暴露在致癌环境中和其他原因导致的慢性肝损等等。缺乏有效的治疗手段是肝癌预后较差的一个主要原因。近年来,肿瘤的免疫治疗成为热点研究,同时研究发现肝癌的性别差异与雄激素受体(AR)有关。研究目的:本篇研究通过分子生物学基础研究,阐明AR基因在肝细胞肝癌的发生发展过程中对肝癌的免疫微环境状态的影响,以及其作用的分子机制。同时针对HCC进行免疫治疗时,探究AR及雄激素对肝癌免疫治疗的影响,并寻找潜在的免疫治疗方案。研究方法:我们利用共培养实验,表面分子结合试验,细胞杀伤试验和流式胞内因子检测试验探究HCC细胞差异表达AR对T细胞功能的影响。随后利用RT-q PCR对差异表达AR的肝癌细胞株进行表面免疫检查点测定并确定目标靶点,随后通过蛋白印迹,流式细胞术实验和免疫组化对靶点进行验证。通过细胞去势实验,荧光素酶报告基因试验和CHIP试验探究AR对HCC免疫微环境调控的分子机制。我们利用临床肝癌患者标本进行免疫组化染色探究体内AR与免疫检查点表达的相关性,并通过小鼠原位成瘤的动物模型试验探究AR对于免疫检查点治疗的影响。研究结果:实验结果证实,肝癌细胞中的AR可以通过抑制免疫检查点PD-L1表达从而引起T细胞的功能改变并影响细胞毒效应。在HCC细胞系中,雄激素受体AR与PD-L1的表达呈负相关性。过表达AR通过结合PD-L1的启动子区域来抑制PD-L1的表达。免疫组化证实在临床标本中也存在AR与PD-L1的负相关性。动物实验证实雄激素可以通过AR协同作用调节PD-L1单抗的治疗作用。研究结论:肝癌作为一种存在性别差异的恶性肿瘤,目前针对进展期的肝癌还缺乏特效的治疗方法。免疫治疗作为一种兴起的治疗方法目前正在广泛应用,影响肝癌性别差异的关键分子AR通过调节细胞的免疫检查点来干扰T细胞对肝癌细胞的免疫监视作用和杀伤功能。在体内肿瘤AR的高表达及血清高雄激素分泌会降低PD-L1单抗的药物敏感性。这些证据提示在未来肝癌免疫治疗中,雄激素及雄激素受体或许可以成为预测抗PD-L1治疗的预测因子。雄激素受体抑制剂与PD-L1单抗联用或许会成为治疗肝癌的有效免疫治疗。