抑郁症是一种复杂的精神疾病,主要症状表现为抑郁心境、兴趣缺失、负罪感或无价值感,以及自杀观念等。目前研究表明,抑郁症引起的疾病负担在全球疾病总负担中排名第二,给社会经济和家庭造成巨大的影响。抑郁症是导致残疾或失能的主要病因。抑郁症广泛发生,病情具有多样性,且复发率较高。但是目前抑郁症的发病机制还不是十分明确,药物治疗效果缓慢且很多人对药物产生抗性。所以研究抑郁症的发病机制,发现新的药物及新的治疗手段是十分必要的。磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate,PIP₂）分布在细胞膜内侧面,其含量约为细胞膜磷脂总量的1%。PIP₂参与胞吞、胞吐作用,是调控囊泡释放及回收的关键物质,影响突触间神经递质释放。PIP₂的含量与神经元突触可塑性密切相关,神经元功能异常可能会导致情绪障碍等精神疾病。研究表明,PIP₂代谢异常会导致阿尔茨海默症;双向情感障碍与磷脂酰肌醇代谢酶有关;长期给予患者抗抑郁药治疗后发现人血小板中磷脂酰肌醇（PIs）升高。所以PIP₂代谢改变很可能与抑郁症发生有关,本课题将对此展开研究。本研究分两部分进行:第一部分,建立社交失败抑郁症动物模型,并进行行为学测试及药物治疗。第二部分,建立高效液相色谱-质谱联用方法检测脑PI（4,5）P2含量,研究社交失败小鼠是否发生PIP₂代谢的改变。第一部分抑郁症动物模型的建立目的:建立社交失败抑郁症动物模型及慢性温和不可预知性抑郁症动物模型,并通过行为学检测评价模型是否成功。方法:1社交失败小鼠模型。连续给予模型组C57小鼠社交失败应激10天,每天10 min,然后进行糖水试验、社交实验、体重称量以及摄食量实验,观察模型小鼠行为是否发生改变。根据社交实验结果将抑郁样行为阳性小鼠分为三组,分别腹腔注射生理盐水、丙咪嗪（20 mg/kg）、帕罗西汀（20mg/kg）进行4周治疗,对照组小鼠注射生理盐水。再次进行社交实验,观察小鼠社交行为是否改变。2慢性温和不可预知性小鼠模型。c57小鼠分为对照组、生理盐水组、丙咪嗪治疗组及帕罗西汀治疗组。生理盐水组、丙咪嗪治疗组及帕罗西汀治疗组小鼠接受应激刺激5周,每天采用3种不同的应激因素刺激小鼠,相邻两天不能采用同种刺激。在第4周开始给予相应的药物进行治疗。糖水测试在实验前、实验第1、3、5周进行。同时检测体重变化、摄食量、旷场中活动及强迫游泳不动时间。3慢性温和不可预知性大鼠模型。将sd大鼠分为对照组和模型组,模型组大鼠接受应激5周,每天采用2种不同应激因素刺激大鼠,相邻两天不能采用同种刺激。应激过程结束后进行糖水试验、旷场实验以及体重测量。结果:1社交失败小鼠模型中,接受社交失败应激的小鼠分成敏感小鼠和非敏感小鼠,前者有抑郁样行为表现,后者没有。与对照组相比,敏感组小鼠出现社交逃避行为（社交时间显著下降）,兴趣缺失行为（糖水偏爱率下降）,同时体重减轻,摄食量增加,表现出抑郁症相关症状。非敏感组小鼠没有表现出社交逃避行为,糖水偏爱率不改变,但是体重下降,摄食量增加。敏感小鼠接受丙咪嗪（20mg/kg）治疗4周后,社交行为增加,抑郁症状改善;2慢性温和不可预知性小鼠模型中,接受慢性温和应激刺激的小鼠与对照组相比表现出糖水偏爱率下降,体重减轻,摄食量增加,活动减少,探索能力下降,强迫游泳不动时间延长等抑郁症状,但给予抗抑郁药治疗2周后并未逆转抑郁症状;3慢性温和不可预知性大鼠模型中,接受慢性温和应激刺激大的鼠与对照组大鼠相比糖水偏爱率下降,体重减轻,探索能力下降,表现出抑郁相关症状。结论:成功建立了社交失败抑郁动物模型,慢性温和不可预知性应激动物模型有待进一步考察。第二部分高效液相色谱-质谱联用方法分析抑郁症动物脑pip2的改变目的:建立高效液相色谱-质谱联用分析pip2的方法,探讨抑郁症与脑pip2代谢改变之间的关系。方法:用高效液相色谱-质谱联用方法分析对照组和模型组小鼠中脑及前额叶突触小体中pip2含量变化。液相条件:watersx-bridgec8柱（100mm×2.1mm,3.5mm）,流速为0.4ml/min,柱温为35℃,进样量为2ml。流动相为A:乙腈:乙胺水溶液（100:0.05）,B:0.05%乙胺水溶液。梯度洗脱条件:0³ min,30%A⁸0%A;3⁵ min,A保持在80%;5min调到初始比例。质谱条件:电喷雾离子源,负离子扫描,多反应离子监测模式。结果:高效液相色谱-质谱联用方法专属性强,标准曲线在12.5²00ng/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.9989）,最低定量限为2 ng/ml,精密度与准确度符合生物样品检测要求,稳定性良好。抑郁症小鼠中脑区域突触小体中PI（4,5）P2显著下降,前额叶区域突触小体中PI（4,5）P2略有增加。结论:高效液相色谱-质谱联用方法适用于PIP₂的定量分析,PIP₂代谢水平改变可能与抑郁症发生有关。