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第一部分缺血性脑卒中(CIS)后的社交隔离导致的卒中后抑郁症(PSD)和卒中后焦虑症(PSA)对神经再生和功能恢复的影响以及转化生长因子-β(TGF-β)在这个过程中的作用目的:确定CIS后社交隔离(socially isolated,SI)导致的PSD和PSA对卒中恢复期海马区神经再生和功能恢复的影响,以及明确TGF-β受抑制是否参与脑卒中后社交隔离导致的PSD、PSA和海马区神经再生和记忆功能的减弱。方法:成年雄性C57BL/6J小鼠大脑中动脉栓塞(MCAO),缺血60分钟后再灌注。每只雄鼠随即被随机分配到两个不同的饲养组,同一只切除卵巢的雌鼠共同饲养(pair-housed,PH),或是单独饲养(socially isolated,SI)。其中部分SI小鼠从CIS后7天开始,连续7天每24小时经左侧脑室给予重组转化生长因子b蛋白(recombinant TGF-β,rTGF-β),或无菌PBS缓冲液。CIS后13天腹腔注射BrdU,间隔8个小时再注射一次,CIS后14天灌注取材检测祖细胞增殖活性。CIS后14天免疫印迹和定时定量PCR检测缺血侧海马区TGF-β的表达水平;小鼠行为学评估分析其抑郁、焦虑程度和记忆功能。结果:行为学评估结果表明,卒中后SI小鼠的焦虑和抑郁程度增加。免疫印迹和定时定量PCR结果显示,与卒中后PH小鼠相比,CIS后14天卒中后SI小鼠缺血侧海马区TGF-β的基因与蛋白表达水平显著下降。CIS后14天,免疫荧光结果显示,与卒中后PH小鼠相比,卒中后SI小鼠缺血侧海马区Ki67~+、PH3~+、BrdU~+、BrdU~+/DCX~+细胞数量显著下降,而rTGF-β可显著增加CIS后SI小鼠缺血侧海马区Ki67~+、PH3~+、BrdU~+、BrdU~+/DCX~+细胞的数量。CIS后14天,行为分析结果显示,与卒中后配对饲养(PH)雄鼠相比,卒中后SI小鼠的记忆功能受损相关行为显著增加,而rTGF-β可显著改善卒中后SI小鼠的记忆功能。结论:缺血性脑卒中后的社交隔离介导的PSD和PSA通过减少海马区TGF-β的表达抑制CIS恢复期海马区的神经再生,并损害记忆功能。第二部分天然抗抑郁药贯叶金丝桃素对卒中恢复期海马区神经再生以及认知功能恢复的作用及其机制目的:明确在脑卒中恢复期对社交隔离小鼠延迟施用一周的贯叶金丝桃素是否能通过抑制PSD和PSA来促进海马区神经再生并修复记忆功能,探讨TGF-β在此过程中的作用。方法:成年雄性C57BL/6J小鼠大脑中动脉栓塞(MCAO),缺血60分钟后再灌注。所有雄鼠均单独饲养,即社交隔离(socially isolated,SI)。从CIS后7天开始,连续7天每24小时经鼻腔给予贯叶金丝桃素(hyperforin),或生理盐水(normal saline,NS)。其中部分卒中后SI小鼠在施用贯叶金丝桃素半个小时前,经侧脑室给予小鼠TGF-β中和抗体(TGF-βneutralizing antibody)或无菌PBS。CIS后13天腹腔注射Brd U,间隔8个小时再注射一次,CIS后14天灌注取材检测神经祖细胞增殖活性。CIS后14天免疫印迹和定时定量PCR检测缺血侧海马区TGF-β的表达水平;小鼠行为学实验评估其抑郁、焦虑程度和记忆功能。结果:CIS后14天,免疫印迹和定时定量PCR结果表明,给予贯叶金丝桃素显著增加了卒中后SI小鼠缺血侧海马区TGF-β的基因与蛋白表达水平。CIS后14天,行为学分析结果显示,贯叶金丝桃素显著降低了卒中后SI小鼠的焦虑和抑郁程度;免疫荧光结果表明,卒中后SI小鼠给予贯叶金丝桃素显著增加了小鼠缺血侧海马区Brd U+、Brd U+/Neu N+细胞的数量;行为学评估结果显示,贯叶金丝桃素显著改善了卒中后SI小鼠的记忆功能。给予TGF-β中和抗体显著阻断了贯叶金丝桃素的抗抑郁、促进神经再生和功能恢复的作用。结论:缺血性脑卒中恢复期延迟施用贯叶金丝桃素通过增加缺血侧大脑TGF-β的表达,抑制了PSD和PSA,进而改善了卒中后社交隔离小鼠神经再生的减少及记忆缺陷。